Analysis of eicosanoids and related metabolites

Význam tématu

Eikosanoidy představují klíčovou skupinu bioaktivních lipidních mediátorů odvozených od mastných kyselin, které řídí zánětlivé odpovědi, vaskulární homeostázi a další fyziologické procesy. Jejich kvantifikace v biologických vzorcích je zásadní pro pochopení patofyziologických mechanismů, identifikaci biomarkerů a hodnocení farmakologických intervencí.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem publikace je prezentovat vysoce citlivou a selektivní LC-MS/MS metodu v režimu MRM pro současnou analýzu 18 eikosanoidů a jejich deuterovaných vnitřních standardů v plazmě. Studie demonstruje optimalizaci chromatografie i hmotové spektrometrie pro robustní kvantifikaci v komplexním biologickém matrixu.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografie: Shim-pack GIST C18-AQ HP, 100 × 2,1 mm I.D., 1,9 µm, kolona temperována na 40 °C
• Mobilní fáze: A – 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě; B – acetonitril; průtok 0,4 mL/min
• Objem injekce: 5 µL vzorku společně s 15 µL vody
• Detekce: LCMS-8060 s elektrosprejovou ionizací (ESI) v pozitivním i negativním módu, režim MRM
• MS parametry: teplota DL 250 °C, interface 270 °C, block heater 400 °C; nebulizační plyn 2,5 L/min, vysoušecí plyn 10,0 L/min, ohřívací plyn 10,0 L/min, tlak CID plynu 230 kPa, dwell time 10 ms, pause time 1 ms

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje baseline separace všech analyzovaných eikosanoidů včetně izobarických sloučenin. Lineární rozsah pokrývá nízké pikogramové až vysoké nanogramové koncentrace, s limity detekce v řádu pg/mL. Retence a plocha špiček vykazují vysokou reprodukovatelnost, což potvrzuje vhodnost metody pro rutinní i výzkumné aplikace.

Přínosy a praktické využití metody

• Citlivá a selektivní kvantifikace komplexních lipidních mediátorů v plazmě
• Podpora výzkumu zánětlivých procesů a farmakodynamických studií
• Možnost sledovat biomarkery kardiovaskulárních a metabolických onemocnění

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu analyzovaných lipidů a jejich metabolitů
• Integrace s vysoce rozlišovacími MS a komplexními lipidomickými platformami
• Automatizace přípravy vzorků a zpracování dat pro vyšší průchodnost
• Využití v personalizované medicíně a systémové biologii

Závěr

Popisovaná LC-MS/MS MRM metoda na Shim-pack GIST C18-AQ HP kolóně přináší robustní, citlivý a reprodukovatelný nástroj pro komplexní analýzu eikosanoidů v biologických vzorcích. Umožňuje rutinní i výzkumné aplikace ve farmacii, klinických studiích i průmyslové analytice.

Reference

Application News 01-00124, Shimadzu Corporation, první vydání září 2024