Analysis of Peptide and Impurities

Význam tématu

Analýza peptidových hormonů je klíčová v oblasti farmaceutického vývoje a kontroly kvality, jelikož peptidy jako somatostatin vyžadují přísné sledování čistoty a identifikaci vedlejších produktů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo ověřit rychlou a citlivou metodu pro separaci somatostatinu a jeho nečistot pomocí reverzní fázové LC-MS s použitím kolony Shim-pack Scepter C18-120 a analyzátoru LCMS-2050.

Použitá metoda

Pro separaci byl využit gradientní běh s mobilními fázemi 0,1 % TFA ve vodě (A) a 0,1 % TFA v acetonitrilu (B):

• Gradient B: 10 % (0–1,5 min) → 80 % (5 min) → 10 % (5,01–8 min)
• Průtok: 0,4 mL/min
• Teplota kolony: 40 °C

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf Nexera X3
• Kolona Shim-pack Scepter C18-120 (50 × 2,1 mm I.D., 1,9 µm)
• Hmotnostní spektrometr LCMS-2050 s ionizací ESI/APCI v pozitivním módu

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožňuje kompletní separaci somatostatinu a jeho peptidových nečistot za méně než 8 minut s vynikající opakovatelností retencí. Detekční citlivost v režimu scan (m/z 250–2000) zajišťuje spolehlivou identifikaci nečistot. Optimalizované parametry plynů a teplot v iontovém zdroji přispívají k stabilnímu signálu a minimalizaci in-source fragmentace.

Přínosy a praktické využití metody

Řešení nabízí vysokou propustnost, šetří čas chromatografie a zjednodušuje kvalifikaci farmaceutických přípravků založených na peptidových molekulách. Vhodné je pro rutinní QA/QC laboratoře i výzkumná centra.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj lze směřovat k integraci s vysokým rozlišením MS, analýze peptidových aglomerátů a rozšíření na biomarkery v klinických aplikacích. Optimalizace pro zelenou chromatografii a mikroprůtokové systémy zvýší udržitelnost a efektivitu.

Závěr

Navržená reverzní fázová LC-MS metoda na kolóně Shim-pack Scepter C18-120 poskytuje rychlou, přesnou a reprodukovatelnou analýzu somatostatinu a jeho nečistot, čímž podporuje standardy kvality v oblasti peptidových léčiv.

Reference

• Application News 01-00625, Shimadzu Corporation, First Edition: Sep. 2024