Analysis of Hydrocortisone

Význam tématu

Stanovení hydrokortizonu pomocí kapalinové chromatografie v kombinaci s hmotnostní spektrometrií je zásadní pro farmakokinetické studie, terapeutické monitorování a bezpečnostní hodnocení glukokortikoidní terapie. Díky selektivnímu rozlišení steroidních hormonů od matričních interferencí lze přesně sledovat metabolické dráhy a optimalizovat dávkování léčiv.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace je představit validovanou metodu na přístroji Nexera X3 spojenou s LCMS-2050 pro rychlou a citlivou analýzu hydrokortizonu za přítomnosti salicylové kyseliny jako interního standardu. Studie demonstruje chromatografické podmínky, parametry hmotnostní spektrometrie a ukazuje schopnost odlišení cílových látek.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá reverzní fázi na sloupci Shim-pack Scepter C18-120 (150×4,6 mm, 5 μm) při objemovém průtoku 1,0 mL/min. Mobilní fáze je gradient acetonitril–0,1% kyseliny mravenčí (25→45→25 % B). Vzorek (10 μL) je detekován PDA při 245 nm. Hmotnostní spektrometr LCMS-2050 pracuje v režimu SCAN (m/z 100–500) s dvojím zdrojem ionizace ESI/APCI, pozitivním i negativním módem. Klíčové parametry: teplota rozprašovače 200 °C, desolvatace 450 °C, plyny N2 (nebulizační 2 L/min, sušící 5 L/min, zahřívací 7 L/min), rozhraní ±3,0/−2,0 kV.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje reprodukovatelného retence hydrokortizonu i salicylové kyseliny s dobrou špičkou a rozlišením během 20 minut. Hmotnostně-spektrometrická detekce poskytuje nízké limity stanovitelnosti (v řádu ng/mL) a vynikající lineární rozsah. Minimalizovaná matriční interference potvrzuje selektivitu metody a stabilitu signálu v časovém průběhu sériových analýz.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a opakovatelná analýza hydrokortizonu v biologických vzorcích.
• Vysoká citlivost vhodná pro farmakokinetické studie.
• Možnost simultánního stanovení dalších sloučenin v podobných podmínkách.
• Jednoduchá příprava vzorků a standardizace pomocí interního standardu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj povede k miniaturizaci chromatografických systémů (micro-LC), nasazení vysokorozlišující hmotnostní spektrometrie (HRMS) a plné automatizaci přípravy vzorků. Integrace s datovou analýzou a umělou inteligencí zrychlí vyhodnocení výsledků a zlepší prediktivní farmakokinetické modely.

Závěr

Popsaná LC-MS metoda nabízí robustní a citlivý nástroj pro analýzu hydrokortizonu v klinických i výzkumných laboratořích. Přesná chromatografická separace a selektivní hmotnostní detekce zajišťují spolehlivé výsledky pro farmakokinetické i QC aplikace.

Reference

• Application News 01-00650 (JP, ENG), Shimadzu Corporation, First Edition Sep. 2024