Analysis of Hydrocortisone - No. 582

Význam tématu

Analýza a purifikace steroidů, jako je hydrokortison, je klíčová pro farmaceutickou výrobu a zajištění kvality léčiv. Přesná separace vedlejších složek a nečistot umožňuje získat vysoce čisté látky nezbytné pro bezpečné a účinné produkty.

Cíle studie

Cílem bylo vyvinout a ověřit reverzní fázovou LC-MS metodu s preparativní kapacitou pro izolaci hydrokortisonu a oddělení hlavních nečistot. Studie se zaměřila na optimalizaci podmínek mobilní fáze, průtoků a detekce pro co nejlepší rozlišení složek.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byl využit preparativní chromatograf Nexera X3 s kolonkou Shim-pack Scepter C18-120 (150×20 mm I.D., 5 µm). Mobilní fáze sestávala z 0,1% kyseliny mravenčí ve vodě (A) a acetonitrilu (B) s gradientem B od 25 % do 45 % během 20 minut. Průtok činil 20 mL/min, teplota kolony byla na ambientní úrovni. Detekce probíhala pomocí PDA při 245 nm. Pro hmotnostní spektrometrii LCMS-2050 byly použity režimy ESI/APCI (pozitivní i negativní ionizace), skenování m/z 100–500 a optimalizované plynové toky a teploty.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila efektivní oddělení hydrokortisonu od dvou hlavních nečistot s dostatečným rozlišením a reprodukovatelnou retencí. Preparativní průtok 20 mL/min a objem injekce 10 mL zajistily vysokou propustnost vzorků. Díky PDA detekci bylo možné rychle identifikovat cílový steroid, zatímco LC-MS potvrdilo jeho molekulární ionty a umožnilo detekci slabších vedlejších složek.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou čistotu získaného hydrokortisonu vhodnou pro farmaceutické aplikace.
• Rychlou a efektivní separaci nečistot, která snižuje náklady na dodatečné kroky čištění.
• Možnost škálovat od analýzy po preparativní purifikaci.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším krokem je integrace vyšších rozměrů chromatografie (LC×LC) pro zlepšení selektivity, využití UHPLC fází pro rychlejší separace a implementace automatizovaných systémů pro kontinuální glukonaci a čištění. Kombinace s vysoko-rozlišujícími hmotnostními spektrometry otevře cestu k detailní strukturní analýze nečistot.

Závěr

Popsaná reverzní fázová LC-MS preparativní metoda pro hydrokortison prokázala vysokou účinnost, reprodukovatelnost a škálovatelnost. Nabízí řešení pro farmaceutický průmysl při výrobě vysoce čistých steroidů.

Reference

• Shimadzu Corporation. Application News 01-00651, First Edition: Sep. 2024.