Analysis of 10 Nitrosamines in an Active Pharmaceutical Ingredient

Význam tématu

Řízené sledování nitrosaminů v léčivých surovinách je klíčové pro zajištění bezpečnosti finálních farmaceutických produktů. Nitrosaminy představují potenciálně karcinogenní látky, jejichž přítomnost i ve stopových hladinách musí být přesně monitorována.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit LC–MS metodiku pro simultánní analýzu deseti nitrosaminů v aktivní farmaceutické složce (API). Metoda měla zajistit spolehlivé oddělení všech sledovaných sloučenin, dostatečnou citlivost a reprodukovatelnost pro rutinní použití v QA/QC laboratořích.

Použitá metodika a instrumentace

Studie kombinovala vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii (UHPLC) s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC–MS/MS).

• Chromatografie (Nexera X3):
• Kolona: Shim-pack Velox Biphenyl, 100 × 2,1 mm, 2,7 μm
• Mobilní fáze A: voda/ kyselina mravenčí (1000:0,5), B: methanol/ kyselina mravenčí (1000:0,5)
• Gradient: 1 % B → 35 % B (0–2 min), 35 % → 60 % (2–5,3 min), 60 % → 98 % (5,3–10 min), návrat na 1 % (10–14 min)
• Průtok: 0,6 mL/min, teplota kolony: 45 °C, objem injekce: 20 µL
• Hmotnostní spektrometrie (LCMS-8060NX×2):
• Ionizace: APCI v pozitivním módu, napětí sondy 4,0 kV
• Detekce: režim MRM, dusík jako rozprašovací a sušící plyn
• Teploty: DL 150 °C, heat block 200 °C, interface 300 °C

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila spolehlivé rozlišení všech deseti nitrosaminů (MeNP, NDMA, NMOR, NMBA, NDEA, NEIPA, NDIPA, NDPA, NMPA, NDBA) během jednoho běhu do 14 minut. Limity detekce se pohybovaly v řádu jednotek až desítek ppt, což je adekvátní požadavkům farmaceutického průmyslu. Výsledky vykázaly vysokou opakovatelnost (RSD < 5 %) a přesnost (obnovení 95–105 %).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je plně automatizovatelná a vhodná pro rutinní kontrolu jak surovin, tak finálních produktů. Vysoká citlivost a krátký analytický čas umožňují zvýšit průtok vzorků a optimalizovat výrobní kontrolu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj v oblasti ultrarychlých LC–MS metod s využitím ještě jemnějších částic kolony (sub-2 µm) a vysokorychlostních skenerů hmotnostních spektrometrů. Dále lze integrovat vysokorozlišovací MS pro potvrzení neznámých nitrosaminů a rozšířit metodiku na analýzu biologických vzorků.

Závěr

Popsaná LC–MS/MS metoda poskytuje efektivní a spolehlivou cestu pro sledování karcinogenních nitrosaminů v aktivních farmaceutických složkách. Vysoká citlivost, rychlost a reprodukovatelnost ji předurčují pro každodenní use v průmyslových i akademických laboratořích.

Reference

• Application News 01-00400 (JP, ENG), Shimadzu Corporation, 2024