Separation of Hydroxybenzoic acids with AZURA Compact

Význam tématu

Separace hydroxykyselin benzoových je klíčová v oblasti potravinářského, farmaceutického i environmentálního průmyslu. Tyto sloučeniny se vyskytují jako izomery se podobnou chemickou strukturou, což klade vysoké nároky na chromatografické metody. Spolehlivá analýza umožňuje kvantifikovat sledované látky v náročných matricích a zlepšit kvalitu kontroly výrobků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit možnost izokratického rozlišení šesti benzoových derivátů (2,6-diOH, salicylová, 2,4-diOH, benzoová, 4-hydroxy a 3,5-diHO-benzoová kyselina) pomocí HILIC chromatografie na přístroji AZURA Compact. Součástí bylo určení detekčních limitů a vyhodnocení robustnosti metody.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda byla založena na HILIC režimu s následujícími parametry:

• HPLC přístroj: AZURA Compact (VPH0060J)
• Kolona: Eurospher II 100-5 HILIC, 150 × 3 mm, 5 μm
• Mobilní fáze: A – 5 mM NH4-acetát (pH 4,78), B – acetonitril;
• Eluce: izokraticky 90 % B
• Průtok: 1,0 ml/min, teplota 25 °C, objem injekce 1 μl
• Detekce: UVD 2.1L, 210 nm, 20 Hz, kyveta 10 mm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila baseline separaci všech šesti látek. Retenční pořadí a detekční limity (LOD) byly stanoveny následovně:

1. 2,6-Dihydroxybenzoová kyselina – LOD 1,55 μg/ml
2. Salicylová kyselina – LOD 1,22 μg/ml
3. 2,4-Dihydroxybenzoová kyselina – LOD 1,47 μg/ml
4. Benzoová kyselina – LOD 4,66 μg/ml
5. 4-Hydroxybenzoová kyselina – LOD 4,64 μg/ml
6. 3,5-Dihydroxybenzoová kyselina – LOD 4,92 μg/ml

Výsledky potvrdily vysokou citlivost a reprodukovatelnost metody, přičemž izokratický režim zjednodušuje provoz a údržbu zařízení.

Přínosy a praktické využití metody

HILIC separace s izokratickou elucí představuje efektivní přístup pro rutinní stanovení hydroxybenzoových derivátů. Metoda se hodí pro QA/QC laboratoře ve farmaceutickém, potravinářském i environmentálním sektoru, kde je potřeba spolehlivě měřit polaritu a koncentraci fenolických sloučenin.

Budoucí trendy a možnosti využití

Mezi potenciální rozšíření patří:

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší selektivitu.
• Optimalizace mobilní fáze s cílem „zelené“ chromatografie (nízká spotřeba organických rozpouštědel).
• Automatizace přípravy vzorků a validace pro zvýšení throughput.

Závěr

Metoda HILIC na přístroji AZURA Compact prokázala rychlou a spolehlivou separaci šesti hydroxybenzoových kyselin s nízkými detekčními limity. Jednoduchý izokratický režim zaručuje jednoduchou implementaci v rutinním provozu.

Reference

Žádné literární zdroje nebyly citovány.