MODERNIZATION OF AN ANTIVIRAL IMPURITIES MONOGRAPH USING THE GLOBALLY HARMONIZED PHARMACOPEIAL GUIDANCE FOR LIQUID CHROMATOGRAPHY

Význam tématu

Modernizace farmakopoejních monografií pro analýzu antivirových nečistot je klíčová pro zajištění kvality léčiv, zvýšení efektivity laboratoří a souladu s mezinárodními standardy. Umožňuje optimalizovat dobu analýzy, spotřebu organické fáze i objem vzorku a přispívá k rychlejší diagnostice a kontrole kvality v průmyslu i výzkumu.

Cíle a přehled studie / článku

Studie demonstruje aplikaci harmonizovaných pokynů USP General Chapter 621 na modernizaci chromatografické metody pro monografii abacavir sulfátu. Cílem bylo přizpůsobit gradientní metodu z HPLC (3.9×150 mm, 5 µm) na moderní UHPLC sloupce (2.1×75 mm, 2.5 µm) i další rozměry, přičemž se zachovají kritéria system suitability a chromatografické parametry.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika vychází z matematických úprav podle USP 621:

• Formula 1 pro úpravu průtoku a objemu injekce při zachování lineární rychlosti.
• Formula 2 pro korekci počátku gradientu vzhledem k průměrnému průtoku a délce sloupce.
• Offset kalkulace pro rozdíl v objemu průtoku a mrtvém objemu systému (přechod HPLC→UHPLC).

Hlavní instrumentace:

• HPLC systémy Alliance HPLC a Alliance iS
• UHPLC systémy ACQUITY Arc a ACQUITY UPLC I-Class PLUS
• Chromatografický software Empower CDS
• Sloupce C18 (Symmetry, XBridge, XSelect HSS T3) v rozměrech 3.9×150 mm, 4.6×150 mm, 4.6×100 mm, 2.1×100 mm, 2.1×75 mm s částicemi 5 µm, 3.5 µm a 2.5 µm.

Hlavní výsledky a diskuse

• Pro všechny modernizované sloupce byla zachována požadovaná separace kritického páru nečistot s rozlišením NLT 1.5.
• System suitability test (SST) vyhověl na HPLC i UHPLC platformách.
• Doba analýzy se zkrátila ze 50 min na pouhých 12 min u nejkratších sloupců.
• Počet běhů za hodinu se zvýšil z 1.2 na až 5 analýz.
• Spotřeba mobilní fáze klesla z 71 mL na 8 mL a objem injekce ze 20 µL na 2.9 µL.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlejší a nákladově efektivnější analýzy.
• Snížení spotřeby organických rozpouštědel a spotřebního materiálu.
• Snadná implementace do stávajících laboratoří a kompatibilita s regulačními požadavky.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření harmonizovaných pokynů pro další monografie, rozvoj online a automatizovaných nástrojů pro výpočet parametrů, větší integrace UHPLC v kvalitativních i kvantitativních analýzách a využití umělé inteligence pro optimalizaci metod.

Závěr

Implementace pokynů USP General Chapter 621 umožnila efektivní modernizaci chromatografické metody pro abacavir sulfát. Matematické korekce zachovaly kritéria system suitability, výrazně zkrátily časy analýz a snížily spotřebu reagencií, aniž by se degradovala kvalita separace.

Reference

1. Catharine E Layton, Paul D Rainville Achieving Method Modernization with the New Liquid Chromatographic Gradient Allowances Provided by USP General Chapter 621 Chromatography and the Alliance iS HPLC System 2023
2. United States Pharmacopeia General Chapter 621 Chromatography Official Date 01-Dec-2022
3. Abacavir Sulfate Monograph Official Date 01-May-2020 United States Pharmacopeia
4. Preparative OBD Column Calculator Waters Corporation Accessed 15-Jan-2023
5. Columns Calculator 2.0 Waters Corporation Accessed 15-Jan-2023