Introducing the Agilent InfinityLab LC Performance Workflow

Význam tématu

Zajištění správné funkce kapalinové chromatografie (LC) je klíčové pro spolehlivou analýzu v průmyslových i výzkumných laboratořích. Rychlé odhalení a lokalizace poruch v systému minimalizuje prostoje a ztráty dat, což vede k vyšší produktivitě a kvalitě výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Článek popisuje zavedení a ověření workflow Agilent InfinityLab LC Performance Workflow, jehož cílem je komplexně otestovat moduly LC systému od vstřikovače až po detekci. Pomocí standardního směsného kalibračního roztoku šesti analytů a přednastavené metody s UV detekcí se hodnotí stabilita retenčních časů, tvar piků a rozlišení mezi klíčovými páry sloučenin.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Vysokotlaká kapalinová chromatografie s gradientním programem: tok 1 mL/min, teplota kolony 40 °C, injekční objem 3 µL.
• Mobilní fáze A: voda s 0,1 % kyseliny mravčí; B: acetonitril (nebo methanol) s 0,1 % kyseliny mravčí.
• Gradient: 5 % B (0 min) až na 95 % B (3–4,5 min), návrat na 5 % B (5 min), post time 2 min.
• Detekce: diodový array detektor (DAD) při 265 nm.

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II LC se DAD detektorem.
• InfinityLab LC Performance Standard kit a Performance Check Column.
• Spotřební materiál: LC voda, acetonitril, methanol, kyselina mravčí, 2 mL lahvičky a PFTE/silikonové zátky.

Hlavní výsledky a diskuse

• Všechny šesti analyty (kofein, benzofenon, DEP, DAP, DHP, DOP) jsou dobře detekovatelné při 265 nm s ostrými, symetrickými piky.
• Kofein elutuje nejdříve; jakékoli posuny retenční doby či štěpení píků indikují nesprávnou rovnováhu fází, únik nebo poškození kolony.
• Pár DEP/BZP hodnotí rozlišení chromatografického systému výpočtem R=(tR2–tR1)/(w1/2 + w2/2); snížení hodnoty R poukazuje na přidané mrtvé objemy či nesprávné gradientní podmínky.
• Poměr ploch píků DEP/DAP (PAR) okolo 0,8 AU monitoruje možné ztráty na vstřikovači.
• Low-level analyt DHP (~1,5 % celkové plochy) ověřuje schopnost detekce stopových nečistot.
• DOP jako nejnepolárnější analyt elutuje na konci programu (95–100 % organické fáze) a slouží k prověření gradientní integrity.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá lokalizace závad v pumpě, autosampleru, koloně či detektoru.
• Kompletní workflow včetně spotřebního materiálu usnadňuje zavedení kontroly kvality instrumentu.
• Snížení prostojů a nákladů na servis díky preventivní diagnostice.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace hmotnostní detekce (LC–MS) pro rozšířenou charakterizaci analytů.
• Automatizované sledování a reportování výkonnosti pomocí pokročilého softwaru.
• Rozšíření standardního mixu o další testovací sloučeniny či detektory (ELSD, FLD).
• Adaptace workflow pro ultra-vysokotlaké LC systémy (UHPLC) a biopolymerní kolony.

Závěr

Agilent InfinityLab LC Performance Workflow představuje robustní a efektivní nástroj pro pravidelnou kontrolu a rychlou diagnostiku kapalinových chromatografů. Díky standardizovanému postupu a specializovaným materiálům je možné minimalizovat prostoje a zajistit dlouhodobě reprodukovatelné výsledky.

Reference

1. 5994-6584EN Introducing the Agilent InfinityLab LC Performance Standard. Agilent Technologies, Inc. July 28, 2023
2. Mutton I.; Boughtflower B.; Taylor N.; Brooke D. The design and use of a simple System Suitability Test Mix for generic reverse phase high performance liquid chromatography–mass spectrometry systems and the implications for automated system monitoring using global software tracking. J. Chromatogr. A. 2011, 1218, 3711–3717.