Modernizing Compendial SEC Methods for Biotherapeutics Using the Alliance™ iS Bio HPLC System

Význam tématu

Modernizace kompendiálních metod velikostně vylučující chromatografie (SEC) je zásadní pro zajištění vyšší efektivity, přesnosti a spolehlivosti při analýze bioterapeutik v kontrolních laboratořích. Regulace kladou důraz na řízení životního cyklu metody, což vytváří potřebu aktualizovat starší, ale validní postupy s ohledem na nejnovější technologické možnosti.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo přenést a modernizovat kompendiální SEC metodu podle USP <129> z legacy HPLC platformy na novou bio-inertní soustavu Alliance iS Bio HPLC System. Studie zahrnovala migraci metody bez změn, následnou optimalizaci dle USP <621> a porovnání výkonu mezi systémy.

Použitá metodika a instrumentace

Reagencie: 0,20 M fosfátový pufrát a 0,25 M chlorid draselný, pH 6,2.
Instrumentace:

• Alliance iS Bio HPLC System se vstupem MaxPeak HPS a bio-inertními materiály
• Legacy HPLC System
• UV detektor (λ=280 nm) a TUV detektor
• Empower 3 CDS a aplikace Intelligent Method Translator (iMTA)
• Kolony: BioSuite Diol SEC (250 Å, 5 µm, 7,8×300 mm), XBridge Premier Protein SEC (250 Å, 2,5 µm, 7,8×150 mm a 4,6×150 mm)

Hlavní výsledky a diskuse

• Migrace metody zajišťuje srovnatelné nebo lepší chromatografické profily bez dodatečné optimalizace.
• Alliance iS Bio snižuje runtime z 30 na 7,5 minuty a spotřebu mobilní fáze až o 82,5 %.
• Resolution mezi monomerem a nečistotami se zvýšila, zejména u nízkomolekulárních nečistot.
• Přizpůsobení dle USP <621> umožnilo zachování L/dp a zvýšení propustnosti vzorku.
• Konfigurovatelné pre-run kontroly na dotykovém panelu snižují riziko chyb a opakovaných analýz.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená produktivita díky kratšímu času analýzy a menší spotřebě rozpouštědel
• Lepší citlivost a přesnost kvantifikace velikostních variant biotherapeutik
• Redukce lidských chyb díky předběžným kontrolám a modernímu softwaru

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace automatizovaných a digitálních nástrojů pro řízení metod, rozšíření bio-inertních materiálů a optimalizace povrchových úprav kolonu. Využití umělé inteligence pro monitoring a prediktivní údržbu HPLC systémů poslouží ke zvýšení spolehlivosti a efektivity QC laboratoří.

Závěr

Alliance iS Bio HPLC System úspěšně umožňuje migraci a modernizaci kompendiální SEC metody pro monoklonální protilátky. Výsledkem jsou kratší analýzy, menší spotřeba reagencií, lepší rozlišení a snížení chybovosti v souladu s regulačními požadavky.

Reference

1. USP. Chromatography <621>. USP-NF, Rockville, MD, 2022.
2. Analytical Procedures for Recombinant Therapeutic Monoclonal Antibodies. USP General Chapter <129>, 2022.
3. Aggregation Analysis Using SE-HPLC and SE-UHPLC Methods in USP Chapter <129>. USP Application Note, 2023.
4. Kizekai L., Shiner S.J., Lauber M.A. Waters ACQUITY and XBridge Premier Protein SEC 250 Å Columns: A New Benchmark in Inert SEC Column Design. Waters Application Note 720007493, 2022.