NEAFS: Synthetic fentanyl analogues and the new Agilent Ultivo Tandem Mass Spectrometer

Význam tématu

Opioidová krize v USA přináší až stovku úmrtí denně v důsledku předávkování. Tradiční opiáty, jako heroin, jsou často ředěny silnými syntetickými fentanyly, jejichž detekce a kvantifikace je pro forenzní i klinické laboratoře náročná, ale klíčová pro včasnou identifikaci a záchranu životů.

Cíle a přehled studie / článku

Studie představuje novou rychlou metodiku založenou na LC-MS/MS pro simultánní analýzu 12 nových syntetických fentanylů a prekurzoru 4-ANPP v moči a séru. Hlavním cílem bylo ověřit výkonnost kompaktního hmotnostního spektrometru Agilent Ultivo Tandem Mass Spectrometer při forenzních aplikacích.

Použitá metodika a instrumentace

Příprava vzorků:

• Moč: zředění negativní moči v poměru 1:10, filtrace přes nanosep 3K, přidání interních standardů (ISTD), sériové ředění od 500 ng/ml do 1 pg/ml.
• Sérum: srážení proteinů acetonitrilem, centrifugace, přídavek ISTD při 50 ng/ml, ředění vodou do finální koncentrace ISTD 25 ng/ml, sériové ředění analogicky k moči.

Analytická sestava:

• UHPLC systém Agilent 1290 se C18 kolónou Poroshell 120 EC-C18 (2,1×100 mm, 2,7 µm) při 55 °C, gradient 6 min mezi mobilními fázemi A (5 mM amonný formiát/0,01 % kyseliny mravenčí) a B (0,01 % kyseliny mravenčí v methanolu), průtok 0,5 ml/min.
• Hmotnostní spektrometr Agilent Ultivo Tandem MS s AJS ESI pozitivním iontováním, zdrojová teplota 325 °C, suchý plyn 9 l/min, mlžný plyn 35 psi, rozlišení Q1/Q3 0,7 amu, MRM režim 38 přechodů, dwell time 10 ms.

Použitá instrumentace

• UHPLC Agilent 1290 Binary Pump, kolóna Poroshell 120 EC-C18
• Hmotnostní spektrometr Agilent Ultivo Tandem MS
• Filtrační zařízení Nanosep 3K
• Standardy a interní standardy z Cerilliant a Cayman Chemicals
• Biologické matrice z Golden West Biologicals

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje lineárních kalibrací v rozsahu 1 pg/ml až 500 ng/ml s koeficienty determinace R2 ≥ 0,997. V moči jsou meze stanovitelnosti (LLOQ) 50–100 pg/ml, ve séru 10–50 pg/ml, při rozmezí RSD < 10 % na LLOQ. Chromatogramy jednotlivých přechodů prokázaly dobrou separaci a vysoký signál při krátké analýze 6 min.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá šarže do 6 min umožňuje vysokou propustnost vzorků.
• Jednoduchá příprava bez pevné fáze minimalizuje náklady a manipulaci.
• Citlivost a selektivita pokrývají klíčová nová syntetika v nízkých koncentracích.
• Metoda je vhodná pro forenzní toxikologii i klinickou toxikologii.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření panelu sledovaných syntetických analoga, integrace automatizovaných vzorkovačů a vysokopropustných systémů. Další vývoj může zahrnovat implementaci umělé inteligence pro interpretaci MRM dat a nasazení přístrojů typu „lab-on-a-chip“ pro terénní testování.

Závěr

Popisovaná LC-MS/MS metoda na přístroji Agilent Ultivo TMS nabízí kombinaci rychlosti, robustnosti a vynikající citlivosti potřebné pro forenzní detekci nových syntetických fentanylů v biologických matricích.

Reference

Uvedené literární odkazy nejsou k dispozici v původním textu.