Incredibly Powerful, Remarkably Efficient Quantitation

Význam tématu

Massová spektrometrie v kombinaci s kapalinovou chromatografií je standardní přístup pro cílenou kvantifikaci stopových látek v komplexních matricích. Compactní, spolehlivý a snadno obsluhovatelný kvadrupólový systém Ultivo LC/TQ s EMF zpětnou vazbou a software MassHunter Productivity zvyšuje produktivitu laboratoří s vysokým průtokem vzorků. Umožňuje rychlé nasazení metod, omezuje nároky na prostor a údržbu a nabízí výbornou citlivost a reprodukovatelnost.

Cíle a přehled studie / článku

Široká řada aplikací byla demonstrována na novém Ultivo LC/TQ systému:

• Stanovení volných aminokyselin v matrici živočišných krmiv.
• Kvantifikace malých molekul léčiv v lidském séru.
• Analýza nových syntetických fentanylů v séru a moči.
• Detekce pesticidů a aflatoxinů v konopí.

Každá aplikace byla optimalizována pro maximální citlivost, selektivitu a rychlost analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro všechny studie byl použit Agilent Ultivo LC/TQ vybaven Infinity II HPLC modulem a softwarovým balíkem MassHunter Productivity:

• Kapalinová chromatografie: sloupce Poroshell 120 HILIC-Z (aminokyseliny), Zorbax Eclipse Plus C8 (léčiva), EC-C18 (fentanyly) a Phenyl-Hexyl (pesticidy).
• Mobilní fáze s formiátovým či octanovým pufrem, gradienty 0,5–0,6 mL/min a teploty 25–55 °C.
• MS parametry: suchý plyn 150–325 °C, tlak 9–20 psi, napětí na kapiláře 2000–5500 V, cyklus 350–500 ms, režim dMRM a mixed-mode acquisition pro neznámé izobary.

Příprava vzorků zahrnovala standardní extrakci, srážení bílkovin a ředění dle matrice.

Hlavní výsledky a diskuse

Ve všech aplikacích systém Ultivo prokázal vysokou citlivost a přesnost:

• Aminokyseliny v krmivech: LOQ 3,5–18 ppb, lineární křivky R2>0,995, RSD <10 %.
• Malá léčiva v séru: detekční limity 5 pg/mL, LOQ 0,1 ng/mL, přesnost 95–105 %, RSD <5 %.
• Syntetické fentanyly: LLOQ v moči 50–100 pg/mL (1/10 ředění), v séru 10–50 pg/mL (1/6 ředění), linearita přes 5 dekád, reprodukovatelnost pod 15 %.
• Pesticidy v konopí: citlivost 10 ppb, RSD pod 12 %, linearitní rozsah 0,1–100 ppb, simultánní detekce až 66 sloučenin.

Mixed-mode acquisition umožnila identifikovat nekomerčně dostupné standardy dle produktových iontových spekt.

Přínosy a praktické využití metody

Compactní konstrukce šetří laboratorní prostor, EMF zpětná vazba zvyšuje spolehlivost analýz, software MassHunter Productivity zkracuje čas nastavení metody a vyhodnocení dat. Metody lze rychle přenášet mezi laboratořemi a udržovat kvalitu výsledků v rutinním provozu i výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření databáze MRM přechodů umožní rychlé nasazení nových cílových sloučenin. Integrace automatizované přípravy vzorků, vyšší multiplexace analýz a cloudové nástroje pro sdílení metod přímo navazují na principy průmyslu 4.0 a centralizované správy kvality. Mixed-mode režim lze využít k identifikaci nových neznámých kontaminantů a metabolit.

Závěr

Agilent Ultivo LC/TQ v kombinaci s MassHunter Productivity představuje robustní a vysoce efektivní nástroj pro cílenou kvantitativní analýzu stopových látek v různých matricích. Systém spojuje kompaktní provedení s vynikajícími analytickými parametry a usnadňuje práci vysoce průtokovým laboratořím.