The Analysis of Vitamin B12 in Infant Formula

Význam tématu

Vitamin B12 (kobalamin) je klíčový mikronutrient nezbytný pro růst, vývoj buněk a syntézu DNA. V kojenecké výživě se vyskytuje v nízkých koncentracích a jeho spolehlivá detekce je nezbytná pro zajištění kvality potravin a bezpečného doplňování vitamínů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou, citlivou a selektivní metodu pro stanovení volného vitaminu B12 na úrovni jednotek ppb v dětské výživě. Metoda vychází z AOAC Official Method 2014.02, avšak bez použití kyanidových činidel.

Použitá metodika a instrumentace

Pro chromatografickou analýzu byl použit Agilent 1260 Infinity II Prime LC systém s vysokotlakým čerpadlem (až 800 bar), autosamplerem a multikolonovým termostatem. Detekce probíhala na Agilent 1290 Infinity II DAD vybaveném 60 mm InfinityLab Max-Light cartridge flow celou, která zvýšila citlivost ve srovnání se standardní 10 mm cestou. Matrice byla čištěna na imunoadsorpční koloně EASI-EXTRACT VITAMIN B12 (LGE) od R-Biopharm.

Hlavní výsledky a diskuse

Limit kvantifikace LOQ byl stanoven na 1,2 ng / mL (S/N = 10) z minimální lineární úrovně 3 ng / mL. Lineární rozsah metody 1–250 ng / mL vykázal korelační koeficient R2 blízký 1. Opakovatelnost šesti po sobě následujících injekcí 3 ng / mL standardu prokázala RSD < 0,1 % pro retenční čas a 1,16 % pro plochu píku. Obnova vitaminu B12 z referenčního materiálu NIST1869 dosáhla 88,8 %, což odpovídá specifikacím dodavatele IAC (70–110 %). Analýza komerčního vzorku kojenecké výživy potvrdila spolehlivou detekci 7,1 ng / g.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý běh (3,5 min) zvyšuje laboratořní efektivitu.
• Vysoká citlivost díky dlouhé 60 mm detekční cestě.
• Selektivní očista matrice imunoadsorpční kolonou minimalizuje interferenci.
• Bezpečnostní výhoda: bez použití kyanidových sloučenin.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj snímání vitaminu pomocí hmotnostní detekce a miniaturizovaných LC systémů. Integrace automatizované přípravy vzorků a využití monolitických či nanočásticových kolon může dále zkrátit analýzu a zvýšit citlivost. Populární bude aplikace v dalších nutričních matrix, jako jsou sportovní výživové doplňky nebo alternativní potravinové zdroje.

Závěr

Navržená metoda na bázi Agilent 1260 Infinity II Prime LC ve spojení s dlouhou DAD flow celou a imunoadsorpční očistou poskytuje rychlou, přesnou a citlivou analýzu vitaminu B12 v dětských výživách bez potřeby kyanidů. Splňuje požadavky AOAC Official Method 2014.02 a nabízí robustní řešení pro QA/QC i výzkumné laboratoře.

Reference

1. Zempleni J, Gregory JF, Stover PJ, Suttie JW, Green R et al. Vitamin B12. In: Handbook of Vitamins. 5th ed. Taylor & Francis Group; 2014. p. 447–489.
2. Heudi O, Kilinç T, Fontannaz P, Marley E. Determination of Vitamin B12 in Food Products and in Premixes by Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography and Immunoaffinity Extraction. J Chromatogr A. 2006;1101:63–68.
3. Martin F, Giménez EC, Konings E. New Methods for the Analysis of Water-Soluble Vitamins in Infant Formula and Adult/Pediatric Nutritionals. J AOAC Int. 2016;99:19–25.
4. Gimenez EC. J AOAC Int. 2014;97:1397–1402.
5. R-Biopharm. Product Instruction Manual for EASI-EXTRACT VITAMIN B12 (LGE).