Analysis of APIs in a Pain-Relief Medicine on a Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 Column

Význam tématu

Analýza aktivních farmaceutických látek (API) v kombinovaných přípravcích na úlevu od bolesti je klíčová pro zajištění kvality, bezpečnosti pacientů a souladu s regulačními normami.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a ověřit chromatografickou metodu pro simultánní separaci pěti běžných látek – kofeinu, acetaminofenu, salicylamidu, kyseliny acetylsalicylové a kyseliny salicylové – v jedné analýze pomocí mixed-mode WAX-1 kolony.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla využita HPLC sestava s kolonkou Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 (5 μm, 4,6 × 150 mm). Mobilní fáze obsahovala acetonitril a fosfátový pufr (KH2PO4 6,8 g a NaP2O7•10H2O 0,5 g v 1 000 g D.I. vody, pH 6,0) v poměru 40/60 (v/v). Teplota kolony byla udržována na 30 °C, průtok činil 1,0 mL/min, injekční objem 1 μL a detekce probíhala UV při 220 nm. Přídavek pyrofosfátu v pufru potlačil interferenci kovových iontů.

Postup přípravy vzorku:

• Rozemlety 500 mg tablety na jemný prášek.
• Odměr 400 mg prášku rozpuštěn ve 40 g D.I. vody.
• Sonicace 5 minut a filtrace přes 0,45 μm membránový filtr.
• Dostatečné naředění filtátu vodou (4×).

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda poskytla dobrou separaci všech pěti API během 20 minut. Každá složka vykázala ostré a dobře rozlišené píky bez zřejmých vzájemných interferencí. Použití mixed-mode mechanismu kolony kombinující iontovou výměnu a reverzní fázi umožnilo účinné oddělení látek s různou polaritou a ionizačními vlastnostmi.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je robustní, reprodukovatelná a snadno implementovatelná v kontrolních laboratořích farmaceutického průmyslu. Umožňuje rychlou a spolehlivou analýzu běžných analgetik a snižuje nutnost opakovaných úkonů či použití více separačních postupů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Optimalizace doby analýzy zkrácením gradientu nebo zvýšením průtoku.
• Rozšíření aplikace na další kombinace API či doplňkových látek.
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro potvrzující identifikaci.
• Automatizace přípravy vzorků a online filtrace.

Závěr

Popsaná HPLC metoda s použitím Acclaim Mixed-Mode WAX-1 kolony nabízí efektivní, rychlé a přesné stanovení pěti API v analgetických tabletách. Výsledky potvrzují vhodnost této separační techniky pro rutinní kontrolu kvality.

Reference

Thermo Fisher Scientific Inc. Acclaim Mixed-Mode WAX-1 Application Note, 2009.