NEEDLE WASH MECHANISM AND ITS IMPACT ON HILIC ANALYSIS

Význam tématu

Hydrofobní interakční chromatografie (HILIC) je široce využívaná technika v regulované analýze, avšak při migraci metod mezi různými HPLC systémy mohou nevhodné postupy mytí jehly autosampleru vést k artefaktům, jako je dělení špiček.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat vliv mechanismu mytí jehly na chromatografické parametry při analýze organických nečistot cetirizinu hydrochloridu metodou HILIC na dvou HPLC systémech – Alliance iS a System X.

Použitá metodika a instrumentace

• HPLC systémy: Waters Alliance iS a System X
• Detektory: dvojitá vlnová délka (UV, 230 nm) a variabilní vlnová délka (230 nm)
• Kolona: XBridge BEH HILIC 4,6×250 mm, 5 µm, 130 Å
• Podmínky: izokratická separace (acetonitril:voda: H2SO4 93:6,6:0,4), 25 °C, průtok 1 mL/min, objem injekce 10 µL
• Mycí roztoky: směsi acetonitril-voda (93:7 až 7:93)
• Požadavky: faktor špičky ≤2,0; rozlišení ≥2,0

Hlavní výsledky a diskuse

• Alliance iS systém splnil systémové požadavky pro všechny testované poměry mycího roztoku bez viditelné dělicí špiček.
• System X vykazoval dělení špiček při vyšším podílu vody (20:80 a 7:93), což bylo přičítáno zbytkové vodě na jehle způsobené mechanismem mytí.
• Klíčový rozdíl spočívá ve způsobu mytí: Alliance iS myje jehlu přímo v injekčním modulu z vrchu i zespodu; System X ji nejprve namáčí v mycí stanici.
• Namáčení umožňuje zachycení nadměrného objemu vodného roztoku na jehle, který se následně injektuje se vzorkem, což vede k artefaktům.

Přínosy a praktické využití metody

• Upozornění na klíčový vliv mycího mechanismu na kvalitu HILIC separací.
• Optimalizace poměru mycího roztoku a volby HPLC systému při migraci metod.
• Minimalizace artefaktů v QA/QC a průmyslové analytice.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptivní oplachovací protokoly řízené online senzory zbytkového rozpouštědla.
• Inovace v návrhu autosamplerů s redukovaným zbytkovým objemem mycího roztoku.
• Integrace prediktivních modelů pro simulaci dopadu mycího roztoku na chromatografii.

Závěr

Studie prokázala, že mechanismus a složení mytí jehly zásadním způsobem ovlivňuje kvalitu HILIC analýzy. Při přenosu metod mezi HPLC systémy je nezbytné brát v úvahu konstrukční odlišnosti autosamplerů a optimalizovat parametry mytí jehly.

Reference

• United States Pharmacopeia. Cetirizine Hydrochloride Monograph. USP-NF, Rockville, MD: USP; 2021 Sep 01.