Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC) Method Migration Part 1: From Legacy HPLC Systems to the Alliance™ iS HPLC System

Význam tématu

Hydrophilní interakční kapalinová chromatografie (HILIC) představuje klíčovou separační techniku pro analyty s vysokou polaritou, zejména v regulovaných laboratořích farmaceutického průmyslu. Migrace stávajících HILIC metod mezi různými HPLC systémy je nezbytná pro zachování validovaných postupů a zajištění konzistence výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Účelem studie bylo demonstrovat bezproblémovou migraci USP monografie pro stanovení cetirizinu hydrochloridu a jeho organických nečistot ze dvou starších HPLC systémů na novou platformu Alliance™ iS HPLC. Hodnoceny byly klíčové parametry system suitability, včetně tvaru píku, rozlišení, šumu a reproducibility.

Použitá metodika a instrumentace

Metody:

• Assay: izokratická analýza cetirizinu HCl (10 min, 230 nm)
• Organické nečistoty: izokratická metoda (18 min, 230 nm)

Instrumentace:

• HPLC systémy: Legacy System 1, Legacy System 2, Alliance iS HPLC System
• Detektory: 2489 UV/Vis (10 punktů/s), VWD (6,87 Hz), Dual Wavelength UV (10 punktů/s)
• Kolony: XBridge™ BEH™ HILIC 4,6×250 mm, 5 µm, 130 Å
• Převodní lázeň: 25 °C, vzorky udržovány na 10 °C
• Mobilní fáze: ACN/voda/kyselina sírová 93:6,6:0,4
• Injekční objem: 10 µL, průtok 1,0 mL/min
• Software: Empower™ 3 (FR4 a 3.7)

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny tři systémy splnily USP kritéria pro tailing factor, rozlišení a %RSD plochy i retenční doby. Alliance iS HPLC dosáhl nejnižší průměrné RSD plochy (0,042 %) díky vylepšenému vzorkovacímu čerpadlu. U organických nečistot byl výrazně vyšší poměr signál/šum (s/n) na platformě Alliance iS, což je důsledek efektivního mytí jehly před a po injekci. Na Legacy System 2 bylo detekováno přenosné pozadí v blanku, což snížilo vypočtené s/n. Použití intrasample custom pole v Empoweru umožnilo přepočítat s/n bez interferujících šumových špiček a zdůraznilo význam správné metodiky výpočtu.

Přínosy a praktické využití metody

Seamless migrace HILIC metod potvrzuje kompatibilitu starších i nových HPLC platforem, eliminuje nutnost revalidace metod a zrychluje zavádění moderních systémů. Vyšší reproducibilita a citlivost umožňují spolehlivější kvantifikaci stopových nečistot.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další optimalizace automatického mytí jehly a vnitrosystémových úprav pro eliminaci carryover
• Integrace pokročilých výpočetních polí a umělé inteligence pro adaptivní vyhodnocení šumu
• Rozšíření aplikací HILIC do metabolomiky a proteomiky s komplexními biologickými matricemi

Závěr

Studie prokázala, že HILIC metoda pro cetirizin hydrochlorid a jeho organické nečistoty může být bez problémů migrována na novou HPLC platformu Alliance iS. Nové technické prvky přinášejí lepší reproducibilitu a citlivost, což podporuje modernizaci laboratorních procesů.

Reference

1. USP Monograph: Cetirizine Hydrochloride. USP–NF, 01 Sep 2021.
2. USP General Chapter 621 Chromatography. USP–NF, 01 Apr 2023.
3. Waters Tip93: How to Create an Intersample Custom Field, 11 Nov 2022.