Agilent 1200 Series LC Method Development Solution – Automated method development with up to eight columns

Význam tématu

Vývoj HPLC metod je klíčový pro spolehlivou analýzu chemických a farmaceutických vzorků. Rychlá a systematická metoda scoutingu kolony a mobilní fáze umožňuje optimalizovat separaci sloučenin, zkrátit dobu vývoje a zvýšit reprodukovatelnost výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Technická poznámka popisuje automatizované řešení pro vývoj metod na platformě Agilent 1200 Series LC. Cílem je ukázat integraci až osmi sloupců, automatickou výměnu mobilních fází a chromatografických kolon a porovnání výkonu s klasickým RRLC systémem.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika zahrnuje:

• Automatické klastrování až tří termostatovaných kolonních komor SL plus (pro 6–8 kolon)
• Výměnné ventily IN a OUT s nízkodisperzními kapilárami
• Binary pumpa s mikroodplyňovačem
• Autosampler SL plus a DAD detektor SL
• Agilent ZORBAX RRHT a Extend kolony (1,8 µm a 3,5 µm částice)
• Software Agilent ChemStation pro nastavení kanálů CAN, klastrování a řízení ventilů

Hlavní výsledky a diskuse

V experimentu s šesti kolonnami (2,1 mm ID, 1,8 µm) byly vyhodnoceny retenční časy, šířky píků a rozlišení. Zvolená kolona ZORBAX SB-C18 prokázala nejlepší výkon. Přenos metody na standardní RRLC systém vykázal rozdíly < 10 % v retenčních časech, šířkách píků i USP tailingu, a to jak pro 2,1 mm ID, tak 3,0 mm ID kolony. Ukázalo se, že nízkodisperzní konfigurace zachovává vysokou účinnost i při menších vnitřních objemech kolon.

Přínosy a praktické využití metody

Řešení Agilent 1200 Series LC Method Development Solution nabízí:

• Automatizaci scoutingu kolon a mobilních fází bez manuálních zásahů
• Flexibilní kombinaci až osmi kolon se samostatnými teplotními zónami
• Rychlý přechod od hrubého scoutingu k jemné optimalizaci gradientu a teploty
• Bezproblémový přenos vyvinuté metody na standardní RRLC systém

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace pokročilého softwaru pro automatizovaný návrh gradientů a predikci rozlišení, propojení s algoritmy strojového učení pro rychlejší rozhodování, rozšíření na vícerozměrné chromatografie a adaptace na ultrarychlé a kapilární systémy.

Závěr

Automatizované řešení pro vývoj HPLC metod na platformě Agilent 1200 Series LC zkracuje dobu vývoje, zvyšuje flexibilitu testování kolon a mobilních fází a umožňuje snadný přenos metod na standardní RRLC systémy s minimálními změnami výkonu.

Reference

• Agilent Technologies: Agilent 1200 Series LC Method Development Solution Technical Note, publication number 5989-9338EN, 2008