Targeted MRM Testing Using the ACQUITY UPLC I-Class/ Xevo TQ-S micro

Význam tématu

Analytická citlivost a selektivita při detekci biologických toxikantů je klíčová pro klinický výzkum a toxikologii. Kombinace UPLC a hmotnostní spektrometrie umožňuje rychlou a spolehlivou identifikaci a kvantifikaci širokého spektra látek v komplexních maticích.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit výkonnost systému ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro v cíleném módu MRM a porovnat ji s předchozí generací Xevo TQD. Metoda byla aplikována na referenční vzorky lidské moči s negativními i pozitivními kontrolními vzorky.

Použitá metodika a instrumentace

Součástí metodiky bylo 5× naředění vzorků moče mobilní fází, centrifugace a trojité injekce. Chromatografické podmínky zahrnovaly kolonu ACQUITY UPLC HSS C18 (1,8 μm, 2,1×150 mm) při 50 °C, mobilní fáze A: 5 mM amonium formiát pH 3,0, B: acetonitril s 0,1 % kyseliny formiové, průtok 0,4 mL/min. Hmotnostní spektrometrie ESI+ na Xevo TQ-S micro s prekonfigurovanou metodou MRM pro 178 látek včetně dvou přechodů (kvalifikátor, kvantifikátor). Parametry zdroje: kapilární napětí 3,0 kV, desolvační teplota 400 °C, plyn 800 L/h.

Hlavní výsledky a diskuse

• Negativní kontrolní vzorky vykázaly pouze běžné OTC látky (např. kofein) na obou platformách.
• Ve vzorcích S10, C2 a DAU HC2 byly na TQ-S micro zjištěny všechny očekávané látky a navíc α-hydroxyalprazolam a lorazepam, které TQD neodhalil.
• Vzorek DCT-25 % obsahoval benzodiazepiny na úrovni 75 ng/mL; TQ-S micro identifikoval pět dodatečných sloučenin, potvrzující vyšší citlivost.
• Vylepšená elektronika nové platformy zvýšila počet skenů za funkci, čímž se zlepšila reprodukovatelnost a přesnost.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost širšího kvalitativního screeningu i kvantitativní analýzy na jediné platformě.
• Vyšší citlivost pro detekci nízkých koncentrací toxikantů v klinických a forenzních laboratořích.
• Rychlá příprava vzorků a snadná integrace do rutinního workflow.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další rozšíření panelu MRM přechodů pro nové analyty a metabolity.
• Implementace v pokročilých klinických studiích, forenzní analýze a environmentální toxikologii.
• Integrace s datovými platformami a softwarovými nástroji pro automatizovanou interpretaci výsledků.

Závěr

ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro prokázal významné zlepšení citlivosti a rozšíření detekčních schopností ve srovnání s Xevo TQD. Metoda nabízí robustní a univerzální přístup pro cílené MRM testování v klinickém výzkumu.

Reference

1. Roberts M., Lee R., Wood M. Targeted MRM Screening for Toxicants in Biological Samples by UPLC-MS/MS. Waters Application Note 720002749EN, 2009.
2. Rosano T., Wood M., Swift T. Postmortem Drug Screening by Non-Targeted and Targeted UPLC-MS/MS. Journal of Analytical Toxicology 35:411–423, 2011.
3. Roberts M., Wood M. Forensic Toxicology Screening using ACQUITY I-Class with Xevo TQD. Waters Application Note 720004602EN, 2013.
4. Waters Corporation. Xevo TQ-S micro Product Brochure 720005046EN, 2014.
5. European Workplace Drug Testing Society Guidelines. EWDTS, přístup 11. 1. 2016.