Analysis of Caffeic acid in Dandelion

Význam tématu

Studie se zaměřuje na stanovení kyseliny kaféové v komerčně dostupném prášku z pampelišky. Kyselina kaféová je významná fenolická sloučenina s antioxidačními vlastnostmi, jejíž sledování je klíčové pro kontrolu kvality bylinných produktů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce je vyvinout a validovat reverzně-fázovou HPLC metodu pro kvantifikaci kyseliny kaféové v pampeliškovém prášku. Metoda využívá Shim-pack GIST C18-AQ kolonu a UV detekci při 323 nm pro selektivní a citlivé měření.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

1. Odměření 1 g pampeliškového prášku do 50 mL kuželové baňky.
2. Přidání 10 mL 5% kyseliny mravenčí v methanolu.
3. Uzavření baňky a zvážení pro stanovení hmotnostního rozdílu.
4. Ultrazvuková extrakce (250 W, 40 kHz) po dobu 30 minut.
5. Po ochlazení opětovné zvážení baňky a doplnění extrakčního roztoku na počáteční hmotnost.
6. Protřepání, centrifugace a odběr supernatantu pro HPLC analýzu.

Použitá instrumentace

• Kolona: Shim-pack GIST C18-AQ (250 × 4,6 mm, 5 μm).
• Mobilní fáze: fosfátový pufr (pH 3,9) : methanol = 78,5 : 21,5.
• Průtok: 1,0 mL/min.
• Teplota kolony: 40 °C.
• Objem injekce: 10 μL.
• Vial: LabTotal Vial pro LC/LCMS.
• Detekce: UV při 323 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala jasné oddělení a kvantifikaci kyseliny kaféové jak ve standardním mixu, tak ve vzorku pampelišky. Chromatogramy vykazovaly konzistentní retenční čas a dostatečnou citlivost pro koncentrace kolem 10 μg/mL.

Přínosy a praktické využití metody

Navržený postup umožňuje rychlou a spolehlivou analýzu fenolických látek v botanických produktech, vhodnou pro rutinní kontrolu kvality v laboratořích potravinářského i farmaceutického průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro potvrzení struktury a zvýšení citlivosti.
• Vývoj ekologicky šetrných solventních systémů a zkrácených kolón pro rychlejší analýzu.
• Automatizace přípravy vzorků pomocí robotických stanic.
• Rozšíření metody na další fenolické sloučeniny a botanické extrakty.

Závěr

Reverzně-fázová HPLC metoda pro stanovení kyseliny kaféové v pampelišce je robustní, reprodukovatelná a vhodná pro rutinní měření. Poskytuje efektivní nástroj pro kontrolu kvality bylinných produktů.

Reference

1. Shimadzu Corporation. Application Note ERAS-1000-0073, 2023.