Analysis of Oxymatrine and Matrine in Sophora

Význam tématu

Oxymatrin a matrin jsou klíčové alkaloidy získávané z rostlin rodu Sophora. Jejich stanovení je zásadní pro kontrolu kvality bylinných přípravků a pro farmakologický výzkum.

Cíle a přehled studie / článku

Tento whitepaper popisuje vývoj a validaci chromatografické metody pro separaci a kvantifikaci oxymatrinu a matrinu v komerčním prášku Sophora pomocí reverzně fáze LC a UV detekce.

Použitá metodika

• Příprava vzorku: 0,3 g komerčního prášku proseto přes síto No. 3, přidání 0,4 ml koncentrovaného roztoku amoniaku a 25 ml chloroformu.
• Ultrazvuková extrakce (250 W, 33 kHz, 40 min), následné doplnění chloroformu na původní hmotnost a filtrace.
• Vysušený filtrát se rekonstituoval v 10 ml absolutního ethanolu.
• Chromatografická analýza: gradient mobilní fáze (0–60 % acetonitrilu v 50 min), průtok 1,0 ml/min, kolona 20 °C, detekce při 225 nm.

Použitá instrumentace

• Kolona Shim-pack GIST C18 (250 × 4,6 mm, 5 µm, P/N 227-30017-08).
• Mobilní fáze A: 0,01 mol/l amoniový acetát s hydroxidem amonným (pH 8,1), B: acetonitril.
• Gradient: 0 % B (0 min) → 30 % (20 min) → 40 % (40 min) → 60 % (50 min).
• Detektor UV 225 nm, injekční objem 5 µl (standard) / 7 µl (vzorek).
• Vial LabTotalTM pro LC/LCMS (P/N 227-34001-01).

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatogram referenční směsi ukázal dobře oddělené vrcholy oxymatrinu a matrinu s reprodukovatelnými retenčními časy. Analýza vzorku komerčního prášku potvrdila spolehlivou kvantifikaci obou alkaloidů. Diskuse upozorňuje na vliv pH a gradientu na rozlišení složek.

Přínosy a praktické využití

• Rychlá a přesná kvantifikace alkaloidů v bylinných výrobcích.
• Jednoduchá a opakovatelná příprava vzorků ultrazvukem.
• Vysoká reprodukovatelnost měření, vhodná pro QA/QC laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Kombinace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení citlivosti.
• Automatizace extrakce a přípravy vzorků pro vyšší propustnost.
• Miniaturizované kolony a mikroflow systémy ke snížení spotřeby rozpouštědel.
• Rozšíření metody na další bioaktivní komponenty bylin.

Závěr

Popsaná metoda LC-UV na kolonu Shim-pack GIST C18 poskytuje robustní a spolehlivé stanovení oxymatrinu a matrinu. Jednoduchá příprava vzorků a reprodukovatelné výsledky podporují její implementaci v průmyslových i výzkumných laboratořích.

Reference

V dokumentu nejsou uvedeny žádné literární odkazy.