Simultaneous Determination of Naphazoline Hydrochloride and Pheniramine Maleate along with their Related Compounds by High Performance Liquid Chromatography on an Alliance™ iS HPLC System

Význam tématu

Analytická kontrola farmaceutických kombinací přispívá k bezpečnosti a účinnosti léčiv. Současné monografie USP se aktualizují s cílem modernizovat zastaralé metody, minimalizovat používání nebezpečných organických rozpouštědel a zjednodušit rutinní analýzu více účinných látek v jednom běhu chromatografie.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout jedinou HPLC metodu pro simultánní stanovení naphazolin-hydrochloridu a pheniramin-maleátu v očních a nosních roztocích včetně jejich přidružených sloučenin. Studie integruje tři USP monografie do jednoho chromatografického běhu a ověřuje vhodnost metody pro rutinní QA/QC analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci a kvantifikaci látek byla použita následující instrumentace:

• Chromatograf: Alliance™ iS HPLC System s detektorem TUV (260 a 280 nm)
• Kolona: XSelect™ CSH C18, 5 µm, 4,6×150 mm, teplota 40 °C
• Mobilní fáze A: voda s 0,05 % triethylaminu a 0,05 % kyseliny fosforečné
• Mobilní fáze B: acetonitril s 0,05 % kyseliny fosforečné
• Gradient: 6 min při 5 % organické fáze, poté lineární přechod na 95 % B během 7 min
• Průtok: 2,0 mL/min, objem injekce: 8 µL, teplota vzorku: 5 °C
• Software: Empower™ 3 Chromatographic Data System

Hlavní výsledky a diskuse

Systémová vhodnost (12 replikát) pro naphazolin a pheniramin prokázala RSD < 0,1 % pro plochy a < 0,15 % pro retence, což potvrzuje výjimečnou opakovatelnost. Lineární závislost signálu na koncentraci v rozsahu 80–120 % byla potvrzena koeficientem R2 > 0,997. Rozlišení mezi API a přidruženými látkami dosáhlo minimálně USP rozlišení 2,4. Intra-denní a mezi-denní přesnost se pohybovala pod 0,6 % RSD pro plochy i časy eluce. Metoda byla úspěšně aplikována na komerční oční a nosní roztoky, přičemž výtěžnost stanovení API splnila požadavky USP (90–110 %).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje:

• nahradit tři samostatné chromatografické analýzy jedním během,
• snížit množství nebezpečných organických odpadů,
• urychlit rutinní QA/QC kontrolu farmaceutických přípravků,
• zjednodušit validaci v souladu s modernizovanými USP monografiemi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření této přístupu na další kombinace API, integrace do plně automatizovaných systémů a další optimalizace metod kvality pro zelenou chemii. Studie může inspirovat revize dalších monografií USP a podpořit snížení environmentálního dopadu farmaceutických analýz.

Závěr

Vyvinutá HPLC metoda na systému Alliance iS umožňuje rychlou, přesnou a robustní simultánní detekci naphazolin-hydrochloridu, pheniramin-maleátu a jejich přidružených sloučenin. Metoda splňuje kritéria USP pro systémovou vhodnost, linearitu, přesnost, rozlišení a výtěžnost v reálných vzorcích.

Reference

1. Uncini A, De Nicola G, Di Muzio A et al. Topical Naphazoline in Treatment of Myopathic Ptosis. Acta Neurol Scand 87(4) 1993 322–324.
2. Quan L, He H. Treatment With Olopatadine and Naphazoline Hydrochloride Reduces Allergic Conjunctivitis in Mice. Mol Med Rep 13(4) 2016 3319–3325.
3. USP Monograph. Naphazoline Hydrochloride Nasal Solution. USP40-NF35, official December 2017.
4. USP Monograph. Naphazoline Hydrochloride Ophthalmic Solution. USP40-NF35, official December 2017.
5. USP Monograph. Naphazoline Hydrochloride and Pheniramine Maleate Ophthalmic Solution. USP40-NF35, official December 2017.