Chromatography Columns and Supplies Catalog

Význam tématu

Správný výběr chromatografické kolony je klíčový pro dosažení vysoké účinnosti, reprodukovatelnosti a selektivity v kapalinové chromatografii. Volba vhodné částicové technologie, povrchové úpravy a velikosti částic umožňuje optimalizovat rozlišení analytů, minimalizovat nežádoucí interakce se stacionární fází a zkrátit dobu analýzy. S rozvojem UPLC, UHPLC i tradičních HPLC systémů je třeba přizpůsobit konfiguraci kolony vlastnostem přístroje a požadavkům aplikace.

Cíle a přehled článku

Cílem textu je představit jednotlivé technologie částic (BEH, CSH, HSS, solid-core) a jejich chemie (C18, C8, fenyl, amide, HILIC apod.) a navést uživatele při volbě nejvhodnější kolony pro různé druhy separací (reverzní fáze, HILIC, iontová výměna, SEC). Popisuje se také vliv systémové disperze a poměr délky kolony ku velikosti částice (L/dp) na konečné rozlišení.

Použitá metodika a instrumentace

Charakteristiky kolony jsou definovány:

• Částice BEH (Ethylene Bridged Hybrid) – propustnost při extrémním pH a teplotách, univerzální C18 a speciální fáze (AX, amide).
• CSH (Charged Surface Hybrid) – kontrolovaný povrchový náboj, zlepšená špičatost bazických látek, rychlé přechody pH.
• HSS (High Strength Silica) – 100% silika pro zvýšenou retenci polárních látek, mechanická odolnost při vysokém tlaku.
• Solid-core (CORE shell) – pevné jádro s tenkou porézní vrstvou pro maximální účinnost a nižší zpětný tlak.
• Kolonové konfigurace – volba průměru a délky kolony podle systémové disperze (nano, UPLC, UHPLC, HPLC).

Hlavní výsledky a diskuse

Výsledky ukazují, že zachování konstantního poměru L/dp dovoluje přenést metody mezi různými systémy bez ztráty rozlišení. Správný výběr chemie stacionární fáze (např. BEH C18 pro obecnou reverzní fázi, BEH Amide pro HILIC nebo CSH pro bazické sloučeniny) dramaticky zlepšuje selektivitu a tvar píku. Systémy s nízkou disperzí těží z kolonek s menšími částicemi a menšími vnitřními průměry, zatímco systémy s vyšší disperzí lépe fungují s robustnějšími kolonkami.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená citlivost a reprodukovatelnost díky minimalizaci nežádoucích interakcí.
• Rychlejší vývoj metod použitím univerzálních a aplikacím přizpůsobených technologií.
• Méně údržby kolony a delší životnost při volbě odolných částic při vysokém pH a teplotě.
• Možnost přímého přenosu metod mezi UPLC, UHPLC a HPLC systémy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším krokem je aplikace speciálních povrchových úprav, jako jsou MaxPeak HPS či TruView, pro zvýšenou odolnost vůči kovovým iontům a zlepšení analýz kyselých lipofilních látek či oligonukleotidů. Zároveň rostou požadavky na ultra rychlé a vysoce účinné kolony pro metabolomiku a proteomiku, kde hrají klíčovou roli nové hybridní a solid-core technologie.

Závěr

Přehled částicových technologií a jejich chemických variant umožňuje analytikům zvolit optimální kolonu pro danou aplikaci a přístroj, což vede k lepšímu rozlišení, kratší době analýzy a vyšší spolehlivosti výsledků. Systematická volba L/dp a sladění kolony s vlastnostmi LC systému je základem robustních metod.

Reference

• Waters Corporation. Ethylene-Bridged Hybrid (BEH) Technology Whitepaper.
• Waters Corporation. Charged Surface Hybrid (CSH) Technology Whitepaper.
• US Pharmacopeia. General Chapters “L” Column Classifications.