XBRIDGE HPLC COLUMNS

Význam tématu

Cíle a přehled studie / článku

• vysokou reprodukovatelnost mezi kolonkami a šaržemi
• vynikající stabilitu v širokém pH rozsahu (1–12)
• širokou škálu chemických fází (C18, C8, Phenyl, Shield RP18, HILIC, Amide)
• kompatibilitu s různými částicovými velikostmi (1,7–10 µm) a s technikami UPLC a preparativní HPLC

Použitá metodika a instrumentace

• van Deemterova křivka pro hodnocení efektivity a hmotového přenosu
• zrychlené testy stability v nízkém (pH 1–3) a vysokém (pH 10–12) pH za ostrých podmínek
• porovnávací chromatogramy pro peak shape, kapacitu a retenci (sloučeniny modelové směsi, neurotransmitery, metabolity)
• testy flash kolonek (OBD) pro škálovatelnost na preparativní úrovni
• screeningové matice pro rychlý výběr fáze, pH a organického komponentu

• Waters Alliance HPLC (model e2695) s PDA detektorem (2996)
• ACQUITY UPLC H-Class / I-Class se sub-2 µm BEH kolonkami
• AutoPurification™ se ZQ™ hmotovým spektrometrem
• VanGuard™ cartridge pro ochranu analytických kolon

Hlavní výsledky a diskuse

• XBridge kolony vykazují minimální odchylky retence a symetrií píku mezi výrobními šaržemi.
• BEH částice prokazují vyšší mechanickou odolnost a excelentní stabilitu v rozsahu pH 1–12, oproti konkurenčním silika-fázím až 1000% delší životnost.
• Optimalizované trifunkční a monopodporované ligandy (C18, C8, Phenyl, Shield RP18, Amide) poskytují výjimečný peak shape a kapacitu pro různé analytické cíle, včetně LC/MS a HILIC aplikací.
• Pro HILIC fáze XBridge Amide nabízí vylepšenou retenci neutrálních a kyselých látek a dvojnásobné zvýšení citlivosti v ES- ionizaci.
• OBD design preparativních kolon umožňuje přímou škálovatelnost z analytických metod, vyšší zatížitelnost a stabilní výsledky při izolacích degradantů a syntetických produktů.

Přínosy a praktické využití metody

• Udržování vysoce reprodukovatelného výkonu zlepšuje validaci metod a zkracuje dobu vývoje analytických protokolů.
• Široký pH rozsah a robustní kolony umožňují použití agresivních pufrů (fosfáty, triethylamoniové soli) bez rizika degradace.
• Kompatibilita s LC/MS a HILIC metodami rozšiřuje možné aplikace v metabolomice, bioanalytice a farmaceutickém výzkumu.
• Preparativní OBD kolony zkracují dobu škálování a zvyšují výtěžnost izolací v procesní chemii.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další vývoj hybridních částic s modifikovanými povrchy pro selektivnější interakce a ultra-vysokoteplotní chromatografii.
• Integrace s chytrými softwarovými nástroji pro automatizované screenovací protokoly a prediktivní optimalizaci metod.
• Miniaturizace a vývoj malých kapilárních a mikrofluidních formátů pro snímání vzorků v reálném čase.
• Rozšíření preparativních kapacit pro zelenou chemii a recyklaci kolonního materiálu.

Závěr

Reference

• [1] Analytical HPLC Columns and Standards Wall Chart, Waters Document 720002241EN.
• [2] A Review of Waters’ Bonded Phase Shield Technology and its Use in HPLC, White Paper 720000207EN.
• [3] A Review of Waters Hybrid Particle Technology: BEH Synthesis and Application, White Paper 720001159EN.
• [4] Comprehensive Guide to Hydrophilic Interaction Chromatography, Waters Document 715002531EN.
• [5] Optimum Bed Density Preparative Columns: Technology and Scale-up, White Paper 720001939EN.