Size Exclusion Chromatography Method Migration Between ACQUITY™ Premier and Arc™ Premier Systems

Význam tématu

Size Exclusion Chromatography (SEC) je zásadní pro charakterizaci monoklonálních protilátek, sledování agregátů a fragmentů, které ovlivňují účinnost a bezpečnost bioterapeutik. Moderní přístupy minimalizují sekundární interakce, což zajišťuje přesné a reprodukovatelné výsledky.

Cíle a přehled studie

• Ověřit přenositelnost SEC metody mezi ACQUITY Premier UPLC a Arc Premier UHPLC.
• Porovnat kolony 1,7 µm (ACQUITY Premier) a 2,5 µm (XBridge Premier) se stacionární fází Protein SEC 250Å.
• Posoudit zachování rozlišení a kvantitativní přesnosti pro mAb Remicade a biosimilární Renflexis.

Použitá metodika a instrumentace

• Metoda: isokratická eluce se 1× PBS (pH 7,4).
• Kolony: ACQUITY Premier Protein SEC 250Å (4,6×300 mm, 1,7 µm), XBridge Premier Protein SEC 250Å (7,8×300 mm, 2,5 µm).
• Instrumentace: ACQUITY Premier System, Arc Premier System, Empower Chromatography Data System.
• Nástroje: Waters Column Calculator verze 2.0 pro škálování parametrů.

Hlavní výsledky a diskuse

• Relativní plošný obsah agregátů a fragmentů se mezi systémy lišil o ~0,1 %.
• Kolona 1,7 µm poskytla vyšší rozlišení (nižší úroveň „valley height“), rozdíly však neovlivnily celkovou čistotu (Remicade: 99,4 % vs. 99,3 %, Renflexis: 98,8 % vs. 98,7 %).
• Zvýšení průtoku na kolonu 1,7 µm umožní až 20 % zkrácení doby analýzy při zachování rozlišení.
• MaxPeak HPS technologie zajišťuje snížení nežádoucích interakcí a stabilní výkon napříč platformami.

Přínosy a praktické využití metody

• Spolehlivá migrace metod mezi různými LC systémy a sloupci.
• Minimalizace sekundárních interakcí díky inertním povrchům MaxPeak HPS.
• Možnost analýzy v jednoduchých biorelevantních pufrech bez přídavků solí či organických rozpouštědel.
• Podpora vývoje, výrobního monitoringu a QA/QC v biopharma odvětví.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další optimalizace doby analýzy změnou průměru částic nebo průtoku.
• Implementace automatizovaného workflow v rutinním provozu.
• Rozšíření MaxPeak HPS technologie na další typy analýz a biomolekul.
• Online monitoring výrobních procesů (Process Analytical Technology).

Závěr

Studie potvrdila, že SEC metody založené na MaxPeak Premier kolonech lze úspěšně migrovat mezi UPLC a UHPLC platformami s rozdílem ve výsledcích do ±0,1 %. Tento přístup zvyšuje flexibilitu a spolehlivost analýz bioterapeutik.

Reference

1. Yang H, Koza SM, Yu YQ. Determination of Hydrodynamic Radius With MaxPeak Premier Protein SEC Columns. Waters Application Note, 720007625, 2022.
2. Kizekai L, Shiner SJ, Lauber MA. Waters ACQUITY and XBridge Premier Protein SEC 250Å Columns: A New Benchmark in Inert SEC Column Design. Waters Application Note, 720007493, 2022.