Determination of nitrogen content

Význam tématu

Metoda Kjeldahl je standardní postup pro přesné stanovení celkového dusíku, který je základem pro výpočet obsahu bílkovin a hodnocení kvality vzorků v průmyslové i výzkumné praxi. Je uznávaná farmaceutickými i laboratorními normami, včetně USP.

Cíle a přehled studie

Tento dokument popisuje automatizované stanovení dusíku v heparinu sodném podle obecné kapitoly USP <461>. Cílem je demonstrovat přípravu vzorku, kroky digesce, destilace a titrace a ověřit, že naměřené hodnoty odpovídají stanoveným limitům.

Použitá metodika a instrumentace

Celý postup zahrnuje tři fáze:

• Digesce – organický dusík se v silné kyselině sírové s katalyzátory (síran sodný, síran měďnatý) přemění na amonium.
• Destilace – po přidání hydroxidu sodného se amonium přemění na amoniak, který se parní destilací zachytí v roztoku kyseliny borité.
• Titrace – absorpční roztok se potenciometricky titruje standardní kyselinou sírovou až za první ekvivalentní bod.

Použitá instrumentace

• 905 Titrando – vysoce přesný potenciostatický titrátor ovládaný software OMNIS/tiamo nebo 900 Touch Control.
• 800 Dosino – až čtyři automatické dávkovací moduly pro přesné dávkování činidel.
• iUnitrode s Pt1000 – inteligentní kombinovaná pH elektroda s vestavěným čipem a teplotním senzorem, vhodná pro viskózní či alkalické vzorky.

Hlavní výsledky a diskuse

Naměřený obsah dusíku v heparinu sodném činil průměrně 1,581 % (rel. SD = 1,48 %, n = 5), což splňuje rozmezí 1,3 % až 2,5 % podle USP. Titrační křivky byly ostré a ekvivalentní body jednoznačně určitelné.

Přínosy a praktické využití metody

• Úplná automatizace zvyšuje reprodukovatelnost a snižuje riziko operačních chyb.
• Metoda je univerzálně použitelná pro různé farmaceutické a potravinářské vzorky obsahující dusík.
• Kompletní shoda s GMP/GLP a požadavky USP zajišťuje akceptovatelnost výsledků ve vysoce regulovaných odvětvích.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Propojení s pokročilými analytickými softwary pro online monitoring a správu dat.
• Rozvoj modulů pro souběžné stanovení dalších živin či anorganických prvků.
• Vývoj kompaktních polních přístrojů pro rychlý screening v terénu.

Závěr

Automatizované stanovení dusíku metodou Kjeldahl pomocí systému Titrando poskytuje přesné, reprodukovatelné a plně v souladu s farmaceutickými standardy výsledky. Postup je vhodný pro rutinní analýzy v laboratorních i průmyslových podmínkách.

Reference

Application Note AN-T-195 Metrohm AG – Determination of nitrogen content according to USP general chapter <461>.