APPS: Method for the Analysis and Quantitation of Pharmaceutical Counterions Utilizing Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography

Význam tématu

V analýze farmaceutických protiónů hraje klíčovou roli kvalitativní a kvantitativní stanovení jak aktivních složek léčiv, tak jejich protiónů, což je nezbytné pro zajištění biologické dostupnosti, stability a bezpečnosti léčivých přípravků.

Cíle a přehled studie

• Vytvořit jednotnou metodu HILIC pro současnou identifikaci a kvantifikaci aniontů a kationtů ve formě léčivých solí.
• Zajistit viditelnost jak API, tak protiónů v jednom analytickém běhu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byl využit ACQUITY Arc Premier LC System s kolonou Atlantis Premier BEH Z-HILIC (4,6×100 mm, 2,5 µm, 40 °C) a detekcí pomocí Waters 2424 ELSD (tlak 40 psi, drift 50 °C, zesílení 75). Mobilní fáze v gradientním režimu sestávala z acetonitrilu, deionizované vody, roztoku 200 mM formiátu amonného a 2 % kyseliny mravenčí. Průtok činil 1,4 mL/min, objem injekce 10 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

• Standardní směs sedmi protiónů (nitrát, draslík, sodík, chlorid, fosfát, hořčík, vápník) vykázala RSD <5 % pro plochu a <6 % pro retenční časy (10 injekcí).
• Lineární rozsah pro sodík, chlorid a draslík dosáhl koeficientu determinace R2 >0,997 (log/log fit).
• Kvantifikace protiónů ve vzorcích farmaceutických solí: naproxen sodný (16,4 mM sodíku), metformin hydrochlorid (2,79 mM chloridu) a losartan draselný (2,96 mM draslíku).
• Metoda poskytuje dostatečné rozlišení API i protiónů, přičemž například metformin vykazuje vyšší retenci.

Přínosy a praktické využití metody

Spojení HILIC separace s ELSD detekcí umožňuje zefektivnit QC testování farmaceutických solí jedinou analýzou. Metoda nabízí vysokou reprodukovatelnost, přesnost a široký dynamický rozsah, což zlepšuje sledovatelnost a dokumentaci kvality léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další ionty, včetně organických protiónů a kombinovaných léčiv.
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro potvrzení struktury.
• Miniaturizace a automatizace pro vysokoprůtokové laboratoře.

Závěr

Vyvinutá HILIC metoda s ELSD detektorem prokázala vysokou spolehlivost, linearitu a reprodukovatelnost při analýze farmaceutických protiónů, což přináší inovativní řešení pro rychlé a komplexní QC testování léčivých solí.

Reference

1. Saal C, Becker A. Pharmaceutical salts: A summary on doses of salt formers from the Orange Book. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 2013;49(4):614–623.
2. Staiger B. What Are Salt Forms Of Drugs And Why Are They Different? Walrus Health. 2018.
3. Savjani KT, Gajjar AK, Savjani JK. Drug Solubility: Importance and Enhancement Techniques. International Scholarly Research Notices Pharmaceutics. 2012;2012:1–10.
4. Dotzel M. Q6A Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for New Drug Substances and New Drug Products. U.S. FDA. 2000.
5. Walter T, Berthelette K, Patel A et al. Introducing Atlantis BEH Z-HILIC: A Zwitterionic Stationary Phase Based on Hybrid Organic/Inorganic Particles. Waters Corporation. 2021.
6. Waters Corporation. Waters 2424 Evaporative Light Scattering Detector Operators Guide. 2006.