Simultaneous determination of gamma-hydroxybutyric acid (GHB) and gamma-butyrolactone (GBL) in beverages

Význam tématu

Gamma-hydroxybutyrát (GHB) a jeho prodrug gamma-butyrolakton (GBL) jsou zneužívány jako tzv. KO kapky při trestných činech s látkově usnadněným napadením nebo jako rekreační droga. GBL se v organismu i in vitro rychle přeměňuje na GHB, což ztěžuje legislativní rozlišení obou sloučenin. Spolehlivé a citlivé stanovení GHB i GBL v nápojích je zásadní pro forenzní praxi a dodržování zákonných norem.

Cíle a přehled studie / článku

Vyvinout jednoduchou, rychlou a cenově dostupnou metodu pro simultánní stanovení GHB a GBL v alkoholických i nealkoholických nápojích. Metoda využívá direktní injekci na iontově chromatografickém systému spojenou se spektrofotometrickou UV detekcí, přičemž zajišťuje vysokou citlivost, přesnost a schopnost sledovat in vivo i in vitro přeměny mezi GBL a GHB.

Použitá instrumentace

• Chromatografický systém 850 Professional IC Anion – MCS s Compact IC Interface 771
• Autosampler 863 Compact IC Autosampler
• UV/VIS detektor Lambda 1010 (detekce při 205 nm)
• Kolony: ProntoSil 120-5-C18 AQ Guard a Metrosep Organic Acids – 250

Metodika

Vzorky nápojů (extra dry Martini koktejl, nealkoholické ovocné šťávy) byly naředěny vodou v poměru 1:200 (v/v). Injekční objem činil 20 µl. Jako mobilní fáze se použila 0,5 mmol/l kyselina chlorečná v ultrapure vodě, průtok 0,45 ml/min, teplota kolony 10 °C. Po separaci na C18 fázích probíhala chemická suprese s LiCl a detekce UV při 205 nm. Kalibrační křivky pro koncentrace 10–200 mg/l byly připraveny pěti body.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární závislost signálu na koncentraci: korelační koeficienty R = 0,9998 pro GHB a R = 0,9997 pro GBL.
• Opakovatelnost (RSD) pod 3,1 % v celém rozsahu kalibrace.
• Obnovy při spike-testech v alkoholických nápojích i ovocných šťávách dosahovaly hodnot 98–102 %, bez výrazných maticových interferencí.
• Měření zachycuje přeměnu GBL na GHB v zásaditém i kyselém prostředí, čímž umožňuje sledovat in vivo i in vitro interkonverzi.

Přínosy a praktické využití metody

• Forenzní laboratoře získají rychlý screeningový test pro zkoumání podezřelých vzorků nápojů.
• Metoda nevyžaduje derivatizaci ani složité vzorkové přípravy, což zkracuje dobu analýzy.
• Vysoká citlivost a linearita pokrývají koncentrace relevantní pro detekci při trestném činu i rekreačním zneužití.
• Schopnost sledovat GHB–GBL interkonverzi podporuje objasnění zdravotních a toxikologických aspektů expozice.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možnosti dalšího rozvoje zahrnují:

• Adaptaci metody pro biologické vzorky (krev, moč) s minimální úpravou.
• Integraci s hmotnostní spektrometrií pro potvrzovací a selektivní analýzu.
• Miniaturizaci a portable verze IC přístrojů pro terénní vyšetřování.
• Online monitoring procesů a screening na eventech či v pohostinských provozech.

Závěr

Předložená iontově chromatografická metoda umožňuje spolehlivě stanovit GHB i GBL v širokém spektru nápojových matric. Díky přímé injekci bez derivatizace, vysoké linearitě, opakovatelnosti a absenci maticových efektů představuje efektivní nástroj pro forenzní a QA/QC laboratoře.

Reference

• Shearrow A, Huege K, Bogenschuetz G. Simultaneous determination of gamma-hydroxybutyric acid (GHB) and gamma-butyrolactone (GBL) in beverages. Metrohm Poster No. 8.000.6057EN.