Simultaneous determination of γ-hydroxybutyrate and its precursor substances γ-butyrolactone and 1,4-butanediol in beverages using UHPLC-MS/MS

Význam tématu

Zjišťování γ-hydroxybutyrátu (GHB) a jeho prekurzorů γ-butyrolaktonu (GBL) a 1,4-butanediolu (1,4-BD) v nápojích je klíčové pro forenzní vyšetřování zneužití drog a pro kontrolu kvality potravin. Díky silným sedativním a amnestickým účinkům GHB dochází k využití těchto látek při trestné činnosti, jako je drogově facilitované sexuální napadení či podvody.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem studie bylo vyvinout rychlou a přesnou UHPLC-MS/MS metodu pro simultánní stanovení GHB, GBL a 1,4-BD v různých typech nápojů. Metoda má zajistit dostatečnou citlivost, selektivitu a reprodukovatelnost pro rutinní analýzu v potravinářských i forenzních laboratořích.

Použitá metodika a instrumentace

Sample preparation:

• Dairy a kávové nápoje: 1 g vzorku extrahováno 4 mL acetonitrilu, centrifugace, naředění.
• Ovocné šťávy: 50 mL vzorku filtrováno, 1 g odměřeno a naředěno do 10 mL.
• Sycené nápoje: odplynění ultrazvukem, filtrace 0,22 μm před injekcí.

UHPLC podmínky:

• Kolona: Agilent EclipsePlus C18, 3,0×150 mm, 1,8 μm
• Mobilní fáze: A = voda s 0,02 % kyselinou mravenčí, B = methanol; gradient 5–95 % B za 7,5 min, návrat na 5 % B
• Průtok 0,4 mL/min, teplota 40 °C, injekce 2 μL

MS/MS (Agilent 6470 Triple Quad):

• ESI pozitivní režim, MRM režim
• Drying gas 7 L/min (300 °C), sheath gas 11 L/min (325 °C), nebulizér 35 psi
• Specifické přechody a kolizní energie pro každou sloučeninu

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila separaci všech tří látek do 10 minut s rozlišením GHB/GBL >5. citlivost dosahuje LOQ v submg/kg pořádkách. Linearita kalibračních křivek byla v rozsahu R2 >0,999. Obnovitelnost (recovery) pro různé matrix pohybovala mezi 88,9–108,2 % a opakovatelnost (RSD) mezi 1,1–9,8 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje:

• Rychlý screening podezřelých nápojů v potravinářských a forenzních laboratořích
• Spolehlivou detekci neoprávněných přísad pod mezemi legislativních limitů
• Současné stanovení více látek v jedné analýze, což šetří čas a náklady

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry rozvoje:

• Integrace vysokorozlišené hmotové spektrometrie pro neznámé metabolity
• Plně automatizovaná příprava vzorků a on-line monitoring
• Rozšíření metody na komplexní biologické matrixy (krev, moč)
• Nasazení v přenosných zařízeních pro rychlou kontrolu na místě

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda poskytuje robustní, citlivý a rychlý postup pro simultánní stanovení GHB, GBL a 1,4-BD v nápojích. Splňuje požadavky na přesnost, selektivitu i opakovatelnost pro rutinní forenzní i potravinářskou praxi.

Reference

1. S. Kang, S. M. Oh, K. H. Chung et al., Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 98 (2014) 193–200.
2. E. Bertol, F. Mari, F. Vaiano et al., Drug Testing and Analysis 7(5) (2015) 376–384.
3. E. Bertol, A. Argo, P. Procaccianti et al., Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 70 (2012) 518–522.