Fully automated sample preparation for liquid chromatographic content determinations

Význam tématu

Automatizace předúpravy vzorků významně zvyšuje efektivitu a spolehlivost kvantitativních analýz iontů v pevných matricích jako jsou tablety. Ruční postupy často vyžadují časově náročné homogenizace, filtrace a ředění, což snižuje propustnost laboratoře a zvyšuje riziko lidské chyby.

Cíle a přehled studie

Studie demonstruje plně automatizované spojení vzorkovače 815 Robotic Soliprep s iontovou chromatografií pro stanovení aniontů a kationtů v lécích Singulair a Bezafibrat. Hlavním cílem bylo ověřit přesnost, opakovatelnost a zkrácení celkového času přípravy vzorku.

Použitá metodika a instrumentace

Při zpracování tablet se nejprve dávkuje definovaný objem rozpouštědla přes Luer tip a 800 Dosino, poté se vzorek homogenizuje disperzním zařízením Polytron PT 1300 D. Homogenát je filtrován jednorázovým filtrem a přenášen buď přímo do chromatografu, nebo do zkumavky k dalšímu ředění.

• Chromatografické podmínky pro anionty:
    • Kolona Metrosep A Supp 5 – 100, 30 °C
    • Eluent: 3,2 mmol/L Na₂CO₃ + 1,0 mmol/L NaHCO₃, průtok 0,7 mL/min, objem injekce 20 µL
• Chromatografické podmínky pro kationty:
    • Kolona Metrosep C 4 – 100, 30 °C
    • Eluent: 1,7 mmol/L HNO₃ + 0,7 mmol/L kyseliny dipikolinové, průtok 1,0 mL/min, objem injekce 20 µL
• Instrumentace:
    • 850 Professional IC AnCat – MCS
    • 815 Robotic Soliprep for Liquid Chromatography
    • Polytron PT 1300 D

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky v rozsahu 0,2–50 mg/L vykázaly regrese kvadratické pro anionty a lineární pro kationty s koeficienty korelace ≥ 0,99990. Relativní standardní odchylky (RSD) v nízkých koncentracích (< 1 mg/L) byly:

• Anionty: chlorid ≤ 0,83 %, dusičnan ≤ 2,89 %, síran ≤ 2,02 %
• Kationty: sodík ≤ 0,53 %, vápník ≤ 2,23 %, hořčík ≤ 1,64 %

Stanovené obsahy v lécích:

• Singulair – chlorid 60,1 mg/kg (RSD 0,44 %), dusičnan 10,9 mg/kg (RSD 1,40 %), síran 27,8 mg/kg (RSD 1,90 %), sodík 1125 mg/kg (RSD 0,89 %), vápník 9,07 mg/kg (RSD 2,78 %), hořčík 5,50 mg/kg (RSD 3,64 %)
• Bezafibrat – chlorid 570,7 mg/kg (RSD 0,83 %), dusičnan 22,7 mg/kg (RSD 0,51 %), síran 92,9 mg/kg (RSD 0,94 %), sodík 3254 mg/kg (RSD 0,10 %), vápník 2673 mg/kg (RSD 0,91 %), hořčík 282,3 mg/kg (RSD 1,43 %)

Přínosy a praktické využití metody

Automatizace výrazně šetří čas a náklady, zajišťuje stoprocentní stopovatelnost jednotlivých kroků a snižuje riziko kontaminace. Metoda je vhodná pro rutinní kontrolu kvality farmaceutických produktů i náročné matice potravin, krmiv či sedimentů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření automatizace lze dosáhnout přidáním postupů extrakce pevných vzorků, ředění či automatického přepínání mezi více matricemi. Integrace robotických rukou a online databázových systémů umožní plnou digitální stopovatelnost a vyšší propustnost laboratoří.

Závěr

Přímé inline spojení Robotic Soliprep s iontovou chromatografií představuje robustní, rychlý a reprodukovatelný postup pro stanovení aniontů a kationtů v pevných vzorcích. Vysoké koeficienty korelace a nízké RSD potvrzují spolehlivost metody v rámci farmaceutické kontroly kvality.

Reference

S. Hörtner, H. Risse, A. Wille: Fully automated sample preparation for liquid chromatographic content determinations. Poster Metrohm, 8.000.6044EN.