Benefits of the Cary 3500 Multicell UV-Vis for Protein Analysis

Význam tématu

Rychlá a spolehlivá kontrola kvality biologických vzorků je nezbytná pro analytické a výrobní procesy. Analýza proteinu pomocí UV-Vis spektrofotometrie při velmi nízkých objemech minimalizuje spotřebu vzorku a umožňuje přesné kvantitativní i kvalitativní hodnocení.

Cíle a přehled studie

Studie demonstrovala výhody použití Cary 3500 Multicell UV-Vis pro simultánní měření až šesti ultra-mikroobjemových kyvet. K hodnocení byl použit standard BSA při koncentracích od 0,75 do 3,75 mg ml a PBS jako referenční roztok.

Použitá instrumentace

• Cary 3500 Multicell UV-Vis spektrofotometr s integrovaným pořadačem osmi kyvet
• Ultra-mikroobjemové kyvety o objemu 70 µl, aplikační ploše 2×2,5 mm a optické délce 10 mm

Použitá metodika

• Příprava 0,01 M PBS pH 7,0
• Ředění BSA z 10 mg ml na 0,75–3,75 mg ml
• Simultánní spektrální sken 250–350 nm, averaging signálu 1 s, šířka pásma 1 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Simultánní měření prokázalo lineární odezvu až do absorbance přibližně 2,5 při 278 nm. Čistota vzorků byla ověřena nulovou absorbancí na 350 nm, což nepotřebovalo korekci. Reprodukovatelnost se blížila standardním kyvetám (sdev 0,00042 vs 0,00029), což potvrzuje vysokou přesnost a stabilitu měření.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí výrazné zrychlení analýz, úsporu vzorku, zlepšenou reprodukovatelnost díky simultánnímu měření a jednoduchou detekci kontaminace. Je vhodná pro QC v biofarmaceutickém průmyslu, výzkum i rutinní laboratorní analytiku.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření automatizace a integrace s robotickými stanicemi, použití pokročilých datových algoritmů pro analýzu spekter, další miniaturizace kyvet a adaptace na širokou škálu biomolekulárních aplikací.

Závěr

Cary 3500 Multicell UV-Vis představuje efektivní řešení pro rychlou, přesnou a reprodukovatelnou analýzu proteinů při nízkých objemech. Integrovaný pořadač kyvet snižuje variabilitu a šetří čas i vzorek.

Reference

• Fasman D.G Practical Handbook of Biochemistry and Molecular Biology CRC Press Boston 1992