Nitrosamine impurities analysis using Thermo Scientific™ Orbitrap Exploris™ 120 MS

Význam tématu

Nitrosaminy představují genetotoxické nečistoty v léčivech s prokázaným karcinogenním účinkem u lidí. Regulace a nález zvýšených hladin NDMA a dalších nitrosaminů v léčivých výrobcích vedly k připomínkám a zpětným odvoláním šarží. FDA stanovila mezní hodnoty a požaduje rizikové hodnocení a kontrolní strategie pro snížení tvorby těchto látek ve všech výrobních krocích API a finálních přípravků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout jedinou LC-HRMS metodu pro detekci a kvantifikaci devíti cílových nitrosaminů s vysokou selektivitou, citlivostí, robustností a reprodukovatelností. Metoda je kompatibilní s regulačními požadavky a umožňuje spolehlivou správu dat ve shodě s 21 CFR Part 11.

Použitá metodika

Vzorky byly připravovány extrakcí ranitidinových tablet metanolickou extrakcí (30 mg/ml API), následovanou centrifugací a filtrací. Analýza probíhala pomocí kapalné chromatografie (Vanquish LC) s kolonkou Acclaim Polar Advantage II (2,1 × 100 mm, 2,2 μm) a APCI ionizací.

Použitá instrumentace

• Thermo Scientific Vanquish LC s Acclaim Polar Advantage II kolonkou
• Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 MS (120 000 rozlišení při m/z 200, sub-ppm přesnost s EASY-IC)
• Chromeleon CDS 7.2.10 (integrované řízení, sběr, zpracování dat a reporting, 21 CFR Part 11)

Hlavní výsledky a diskuse

• Vysoká reprodukovatelnost retenční doby (CV 0,7 %) a plochy píku (CV 2,1 %) při 50 opakovaných injekcích.
• Minimální carry-over (<0,2 %) kromě NDBA.
• LLOQ až 0,017 ppm pro většinu nitrosaminů v APCI režimu, splňuje návrh FDA (0,03 ppm).
• Linearity v rozsahu 0,1–50 ng/ml a sub-ppm přesnost masové tolerance kritická pro oddělení izotopů DMF.
• Porovnání APCI vs HESI ukázalo lepší citlivost APCI (2–5× lepší LLOQ).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí robustní, vysoce citlivou a selektivní analýzu nitrosaminů v souladu se směrnicemi FDA. Umožňuje spolehlivý monitoring genotoxických nečistot ve vývoji i výrobě léčiv a podporuje strategie kvality a kontroly rizik.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další typy nitrosaminů a složitější matice (např. biologická média, potravinové doplňky).
• Integrace nových ionizačních technik a vyššího rozlišení MS pro lepší selektivitu.
• Automatizace přípravy vzorků a AI-řízené zpracování dat pro rychlejší rozhodování.
• Nasazení v kontinuálních výrobních procesech a souladu s průmyslem 4.0.

Závěr

Vyvinutá LC-HRMS metoda s Orbitrap Exploris 120 MS poskytuje citlivou, selektivní a reprodukovatelnou analýzu devíti nitrosaminů v lékových formulacích. Splňuje regulační limity a zajišťuje spolehlivé výsledky pro výzkum i rutinní kontrolu kvality.

Reference

1. Hao Yang, Ph.D. Nitrosamine impurities analysis using Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 MS. Thermo Fisher Scientific.