Improved quantitation of eight nitrosamine impurities in metformin drug products using a TSQ Fortis Plus mass spectrometer

Význam tématu

Metformin je široce používané antihyperglykemikum, u kterého byla prokázána přítomnost nitrosaminových kontaminantů s karcinogenním potenciálem. Regulátoři ve světě proto požadují rutinní sledování těchto genotoxických látek na úrovni jednotek ppb. Vývoj robustních, citlivých a selektivních metod hraje zásadní roli při zajištění bezpečnosti a souladu s FDA a EMA směrnicemi.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jedinou LC-SRM-MS metodiku schopnou současně detekovat a kvantifikovat osm hlavních nitrosaminů v produktech s metforminem pod limitem přijatelného denního příjmu. Studie demonstrovala separaci NDMA od interferujícího DMF a porovnala výkon nového triple kvadrupólového hmotnostního spektrometru TSQ Fortis Plus s předchozími systémy.

Použitá metodika a instrumentace

V analýze byla aplikována vysokotlaká kapalinová chromatografie se sloupcem Hypersil GOLD C18 (150×4,6 mm, 3 μm) a gradientním elucí (0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě vs. v methanolu). Detekce probíhala v módu SRM na Thermo Scientific Vanquish Core LC spojeném s TSQ Fortis Plus MS. Ionizace byla testována v HESI i APCI režimu a správa dat byla zajištěna Chromeleon CDS 7.2 s plnou shodou na 21 CFR Part 11.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje LOQ 0,5 ng/mL (5 ppb) až 2 ng/mL (20 ppb) podle zdroje ionizace a analyzovaného nitrosaminu, s lineárním rozsahem až 1 000 ppb. APCI režim poskytuje obecně nižší LOD/LOQ a lepší odolnost vůči matricím. Chromatografická separace zajišťuje baseline rozlišení všech cílových nitrosaminů, včetně kritického oddělení NDMA od DMF. TSQ Fortis Plus vykázal až 4× vyšší integrační plochy pro některé nitrosaminy a stabilní meziinjekční přesnost (%RSD < 9 %) a přesnost v rámci ±15 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Jednotná analýza osmi nitrosaminů v jednom běhu šetří čas a zdroje.
• Soulad s FDA/EMA požadavky na kontrolu genotoxických nečistot.
• Nízké LOD/LOQ umožňují spolehlivou detekci na úrovni pod 10 ppb.
• Flexibilita ionizačních režimů dovoluje přizpůsobení konkrétním matricím.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření této platformy na další farmaceutické produkty, nasazení v režimu vysokopropustných screeningů a integrace s automatizovanými přípravami vzorků. Důraz poroste na digitální auditní stopy, umělou inteligenci pro detekci stopových nečistot a udržitelné, ekologické mobile fáze.

Závěr

Vyvinutá LC-SRM-MS metoda s TSQ Fortis Plus hmotnostním spektrometrem poskytuje vysoce selektivní, citlivý a řízený postup pro kvantitativní stanovení nitrosaminů v metforminu, plně odpovídající regulačním požadavkům a laboratorním standardům.

Reference

1. FDA Information about Nitrosamine Impurities in Medications
2. EMA doporučení k nitrosaminům v humánních léčivech
3. FDA Guidance for Industry – Control of Nitrosamine Impurities
4. FDA validated LC-HRMS metody pro NDMA, ARB a metformin
5. Thermo Fisher Scientific Application Notes: LC-MS/MS nitrosaminy v metforminu