Analytical Method Transfer to Modern UHPLC Instruments

Význam tématu

Modernizace a přenos analytických metod na pokročilé UHPLC platformy je klíčová pro splnění životního cyklu metody podle regulačních požadavků a pro dosažení vyšší efektivity laboratoří. Redukce objemu gradientního zpoždění a zlepšení citlivosti vede k nižšímu výskytu selhání systémové způsobilosti, lepší reprodukovatelnosti a snížení doby provozních odstávek.

Cíle a přehled studie

Studie popisuje systematický přístup k přenosu zhruba 200 HPLC a UHPLC metod na platformu Thermo Fisher Vanquish UHPLC. Hlavním cílem bylo minimalizovat nutnost revalidace, zajistit dodržení požadavků systémové způsobilosti a zvýšit laboratorní produktivitu prostřednictvím mechanistického porozumění chromatografickým systémům.

Použitá metodika

Metodika zahrnovala:

• Stanovení objemu gradientního zpoždění (GDV) původní a cílové soustavy experimentálními a výpočtovými postupy
• Výpočet GDV podle vzorce GDV = FR × (T50 – 0,5 × TG), kde FR je průtok, T50 je doba dosažení 50 % gradientu a TG je doba gradientu bez izokratických fází
• Úprava izokratických fází a případné hardwarové změny pro simulaci původního gradientu
• Ověření systémové způsobilosti podle kritérií USP, včetně citlivosti, teoretických destiček, faktoru špičkování a opakovatelnosti

Použitá instrumentace

V přenosu metod byly využity:

• Vanquish Flex UHPLC se čtyřkanálovým pumpovacím systémem a 100 µl smyčkou autosampléru
• Tunable gradient delay volume modul pro jednoduchou úpravu objemu zpoždění
• Chromeleon CDS a ChromSword Chromeleon Connect software pro řízení a analýzu dat

Hlavní výsledky a diskuse

Přenos provedl více než 200 metod bez nutnosti rozsáhlé revalidace. Klíčové nálezy:

• Zvýšení poměru signál/šum nad požadovanou hranici (USP S/N ≥ 10), čímž se snížil počet selhání systémové způsobilosti
• Redukce faktoru špičkování pro lepší kvalitu špiček a delší životnost kolony
• Zlepšení přesnosti a opakovatelnosti (RSD plochy a retenčního času < 2 %)
• Udržení nebo zlepšení rozlišení mezi aktivní složkou a nečistotami

Přínosy a praktické využití metody

Systematické přenášení metod na UHPLC platformu přineslo laboratorím:

• Rychlejší běh analýz a vyšší propustnost vzorků
• Snížené náklady na opakované náběhy způsobené selháními SST
• Výrazně nižší potřebnou kapacitu údržby
• Jednodušší dokumentaci a soulad s požadavky ICH Q14 a USP

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj nástrojů pro automatizované přenosy metod a optimalizaci pomocí AQbD přístupu a umělé inteligence. Další potenciál spočívá v plné integraci s laboratorními informačními systémy a cloudovými platformami pro sdílení a správu analytických postupů.

Závěr

Mechanicky založený postup přenosu metod na moderní UHPLC platformy umožňuje významné zlepšení výkonu, spolehlivosti a souladu s regulačními požadavky bez rozsáhlé re-validace. To vede k optimalizaci denních laboratorních operací a k dlouhodobé životnosti analytických postupů.

Reference

1 ICH Q14 Analytical Procedure Development, Draft Version Endorsed 24 March 2022
2 USP Chapter 621 System Suitability Requirements
3 Thermo Scientific Case Study 000566 Method Transfer onto the Vanquish UHPLC Platform