Analysis of Iso-α-Acids, α-Acids, and Humulinonesunder EBC 9.47

Význam tématu

Analýza hořkých složek piva, zejména α-kyselin, iso-α-kyselin a humulinonů, je klíčová pro zajištění konzistentní kvality a charakteristické chuti piva v pivovarnictví.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout a validovat reverzně-fázovou HPLC metodu podle směrnice EBC 9.47 pro selektivní separaci a kvantifikaci hořkých složek piva včetně humulinonů, iso-α-kyselin a α-kyselin.

Použitá metodika

Metoda je založena na reverzní fázové chromatografii s gradientní elucí využívající sekci C8 a dvě mobilní fáze: acetonitril/1% citrátový buffer pH 7,0 a methanol. Eluční program optimalizuje rozlišení cílových sloučenin během 45 minut.

Použitá instrumentace

• LC systém: Nexera XR
• Kolona: Shim-pack GIST C8 (250 × 4,6 mm, 5 µm)
• Mobilní fáze A: acetonitril/1% citrátový pufr (pH 7,0) 30:70, fáze B: methanol
• Gradient: 15 % B (0–5 min) → 80 % B (30–33 min) → 15 % B (35–45 min)
• Průtok: 1,0 mL/min
• Teplota kolony: 35 °C
• Objem injekce: 50 µL
• Detekce: UV při 270 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vysokou selektivitu i reprodukovatelnost separace humulinonů, iso-α-kyselin a α-kyselin. Chromatogramy ukázaly jasné, dobře rozlišené píky bez zásadního rušení matricí piva, což umožňuje přesnou kvantifikaci.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá HPLC metoda poskytuje spolehlivý nástroj pro kontrolu hořkosti piva v QA/QC laboratořích a podporuje standardizaci výrobních procesů v pivovarech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat přechod na rychlejší UHPLC systémy, integraci hmotnostní spektrometrie pro zvýšení citlivosti či vývoj online monitorovacích systémů pro průběžné sledování hořkých sloučenin během varu.

Závěr

RP-HPLC metoda podle EBC 9.47 na kolóně Shim-pack GIST C8 je robustní, reprodukovatelná a vhodná pro rutinní analýzu hořkých složek piva.

Reference

• Application News L590 (JP, ENG), Shimadzu Corporation, 2021