High-speed analysis of Xanthohumol

Význam tématu

Analýza xanthohumolu je důležitá pro kontrolu kvality piva a stanovení obsahu bioaktivních flavonoidů. Xanthohumol i jeho izomery ovlivňují chuťové vlastnosti a nutriční profil piva. Rychlá a spolehlivá metoda umožňuje pivovarům i výzkumným laboratořím efektivně sledovat tyto látky v souladu s doporučeními Evropské sládkovské konvence.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo vyvinout vysoce rychlou chromatografickou metodu pro současnou separaci a kvantifikaci hlavních hořčin a flavonoidů z chmele v pivním vzorku. Metoda je založena na použití reverzní fáze s cílem dokončit analýzu do 8 minut při zachování dostatečného rozlišení šesti analyzovaných látek.

Použitá metodika a instrumentace

V metodě byly použity následující komponenty:

• Systém: Nexera X3
• Kolona: Shim-pack Velox C18 (50 mm × 3,0 mm, 1,8 µm)
• Mobilní fáze A: 10 mmol/l fosfátový pufr (pH 2,6) s 0,2 mmol/l EDTA∙2Na
• Mobilní fáze B: methanol
• Gradient: 50 % B (0 min) až 90 % B (6 min), udržení do 7 min, návrat na 50 % B do 8 min
• Průtok: 0,7 ml/min, teplota kolony: 40 °C, injekční objem: 5 µl
• Detekce: UV/vis detektor PDA (SPD-M40)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila v časovém okně 8 minut separaci šesti látek:

• humulinony
• iso-α-hořčiny
• isoxanthohumol
• α-hořčiny
• β-hořčiny
• xanthohumol

Dosahované špičkové rozlišení a opakovatelnost retence byly na úrovni požadované pro rutinní QA/QC analýzu. Rychlá analýza výrazně zkracuje dobu zpracování vzorků a snižuje objem spotřebované mobilní fáze.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí následující výhody:

• vysoký průtok vzorků díky krátké době analýzy
• nízká spotřeba organických rozpouštědel
• vysoká citlivost a reprodukovatelnost
• vhodnost pro rutinní kontrolu kvality v pivovarech

Budoucí trendy a možnosti využití

S dalším rozvojem lze očekávat:

• integraci s hmotnostní spektrometrií pro strukturální identifikaci metabolit
• rozšíření na další skupiny bioaktivních sloučenin v potravinách
• automatizaci přípravy vzorků a high-throughput screening v pivním průmyslu

Závěr

Popsaná UHPLC metoda na kolonce Shim-pack Velox C18 dosahuje rychlé a spolehlivé separace klíčových chmelových hořčin a flavonoidů v pivních vzorcích. Je ideální pro rutinní kontrolu kvality a výzkumné účely díky minimální spotřebě rozpouštědel, vysoké výkonnosti a reprodukovatelnosti.

Reference

1. Shimadzu Application News an_01-00375 (JP, ENG), First Edition: Aug. 2023, ERAS-1000-0450.