Analysis of Isoflavones

Význam tématu

Isoflavony ze sójových produktů jsou ceněné pro své fytoestrogenní a antioxidační účinky. Přesná kvantifikace těchto sloučenin je klíčová pro zajištění kvality potravinářských surovin a doplňků stravy i pro vědecký výzkum jejich zdravotních přínosů.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo vyvinout rychlou a reprodukovatelnou HPLC metodu s reverzní fází pro současné stanovení osmi hlavních isoflavonů ve sójových extraktech a doplňcích stravy. Studie demonstruje rozlišení a citlivost metody na modelových směsích sloučenin.

Použitá metodika

Metoda pracuje s gradientní elucí na C18 kolóně. Mobilní fáze A je 0,1 % kyselina octová ve vodě, fáze B 0,1 % kyselina octová v acetonitrilu. Gradienty začínají na 15 % B, po 5 minutách stoupají na 25 % B, do 20 min dosahují 35 % B, na 20,01 min se přejde na 100 % B až do 25 min a poté se vrací na 15 % B do 30 min. Průtok je 1,0 mL/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 5 µL, detekce při 254 nm.

Použitá instrumentace

• HPLC systém: Shimadzu Nexera X3
• Kolona: Shim-pack GIST-HP C18 (150 × 4,6 mm, 3 µm)
• Detektor: UV při 254 nm
• Podmínky: 40 °C, max. tlak 16,5 MPa, injekční objem 5 µL

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda úspěšně rozlišila osm isoflavonů: daidzin, 6''-O-malonyl daidzin, 6''-O-malonyl glycitin, genistin, 6''-O-malonyl genistin, daidzein, glycitin a genistein. Všechny píky byly ostré a dobře rozlišené do 15 minut. Citlivost umožňuje kvantifikaci na úrovni 2 µg/mL s vysokou opakovatelností.

Přínosy a praktické využití

Metoda nabízí rychlou a spolehlivou kontrolu kvality sójových extraktů a doplňků stravy v průmyslových i akademických laboratořích. Jednoduchá příprava mobilní fáze a univerzální UV detekce zvyšují provozní efektivitu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků pro vyšší propustnost analýz
• Datová integrace pro monitorování kvality produktů v reálném čase
• Rozšíření o LC-MS techniky pro potvrzení struktur a sledování stopových metabolitů

Závěr

Popsaná reverzní fázová HPLC metoda na systému Nexera X3 a Shim-pack GIST-HP C18 poskytuje rychlou, citlivou a reprodukovatelnou analýzu isoflavonů. Vysoká kvalita separace a jednoduchost provozu podporují její široké uplatnění v kontrolních i výzkumných laboratořích.

Reference

• Shimadzu Corporation. Application News 01-00165, First Edition: December 2021.