Simultaneous Determination of Water-soluble Vitamins

Význam tématu

Voda rozpustné vitaminy hrají zásadní roli v energetickém metabolismu, nervové funkci a syntéze biomolekul. Jejich přesná kvantifikace je klíčová pro zajištění kvality potravinových doplňků a farmaceutických přípravků a pro splnění regulačních požadavků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout robustní HPLC metodu na bázi reverzní fáze pro simultánní stanovení osmi hlavních vodou rozpustných vitaminů (thiamin, riboflavin, niacin, nikotinamid, pyridoxin, kyselina pantothenová, kyselina listová, biotin) ve vzorcích s obsahem 20 mg/l každého vitaminu. Studie popisuje optimalizaci chromatografických podmínek a ověření analytických parametrů.

Použitá metodika a instrumentace

Jako mobilní fáze byla použita směs 10 mmol/l fosfátového (sodného) pufru pH 2,6 (fáze A) a acetonitrilu (fáze B) v gradientním programu: 1 % B (0–2,5 min), lineární nárůst na 50 % B (2,5–10 min), návrat na 1 % B (10,01–15 min). Průtok činil 1,2 ml/min, teplota kolony byla 40 °C, objem injekce 10 µl. Detekce probíhala UV detektorem SPD-M20A na vlnové délce 210 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda zajistila dobré rozlišení všech osmi vitaminů během 15 minut s reprodukovatelnými retenčními časy a nízkými relativními odchylkami. LOD a LOQ dosahují hodnot v souladu s normami pro potravinářské a farmaceutické aplikace. Diskutována je stabilita vitaminů v kyselém prostředí a vliv gradientního režimu na selektivitu separace.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost rychlé a simultánní analýzy více vitaminů v jednom chromatografickém běhu.
• Vysoká opakovatelnost a přesnost vhodná pro rutinní kontrolu kvality.
• Jednoduché přípravy mobilní fáze a standardizace metody.

Budoucí trendy a možnosti využití

S nástupem nových kolonek s menšími částicemi a detektorů s vyšší citlivostí lze očekávat zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby organických rozpouštědel. Kombinace s hmotnostní spektrometrií umožní rozšíření spektra stanovených vitamínů a zvýšení selektivity.

Závěr

Popsaná HPLC metoda na koloně Shim-pack MAqC-ODSⅠ poskytuje rychlou, přesnou a reprodukovatelnou analýzu osmi klíčových vodou rozpustných vitaminů. Díky jednoduché přípravě a robustním analytickým parametrům je vhodná pro potravinářské i farmaceutické laboratoře.

Použitá instrumentace

• Kolona Shim-pack MAqC-ODSⅠ (150 mm × 4,6 mm, 5 µm)
• HPLC systém s UV detektorem SPD-M20A

Reference

• Application News L459 (JP, ENG), Shimadzu Corporation, první vydání prosinec 2021, ERAS-1000-0185.