Analysis of Organic acids by UV method

Význam tématu

Analýza nízkomolekulárních organických kyselin je klíčová v mnoha oblastech, jako jsou potravinářský průmysl, biotechnologie, environmentální monitoring či metabolomika. Tyto sloučeniny se vyskytují v komplexních matricích a vyžadují citlivé, selektivní a reprodukovatelné metody pro jejich separaci a kvantifikaci.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo předvést použití kolony Shim-pack GIST C18-AQ HP v kombinaci s UV detekcí pro spolehlivou separaci a detekci sedmi běžných organických kyselin (mravenčí, pyrohroznová, jablečná, mléčná, octová, citrónová a jantarová kyselina). Studie demonstruje chromatografické parametry, reprodukovatelnost a vhodnost stanovení v analytické praxi.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byla zvolena následující sestava:

• Systém: Shimadzu Nexera Series
• Kolona: Shim-pack GIST C18-AQ HP, rozměry 250 mm × 3,0 mm I.D., částice 3 µm
• Mobilní fáze: 10 mmol/l fosforečnanový pufr sodný, pH 2,6
• Průtok: 1,0 ml/min
• Teplota kolony: 40 °C
• Injekční objem: 4 µl
• Vial: 1,5 ml polypropylen (Shimadzu GLC Ltd.)
• Detekce: UV při 210 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Během isokratické eluce byly všechny analyty separovány s dostatečnou rozlišovací schopností. Retenční časy byly stabilní a chromatogram vykazoval ostré píky bez významného šumu. Pufrované podmínky pH 2,6 minimalizovaly interakce kyselin s povrchem kolony a zajistily reprodukovatelné výsledky.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí několik výhod:

• Jednoduché isokratické podmínky bez gradientu
• Rychlá příprava vzorků a minimální spotřeba organických rozpouštědel
• Vysoká reprodukovatelnost retenčních časů
• Dostatečná citlivost UV detekce pro koncentrace řádu desítek mg/l
• Široké uplatnění v kontrolovaných laboratořích QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

Dále lze očekávat kombinaci kolony GIST C18-AQ s hmotnostní detekcí pro zlepšení citlivosti a selektivity, využití rychlejších UHPLC systémů pro zkrácení doby analýzy či rozšíření aplikace na klinické i environmentální vzorky. Vývoj pufrů a modifikace povrchu kolony mohou dále optimalizovat separaci vysoce polárních látek.

Závěr

Použitá metoda umožňuje spolehlivou, reprodukovatelnou a relativně rychlou analýzu sedmi běžných organických kyselin pomocí HPLC s UV detekcí. Shim-pack GIST C18-AQ HP prokázala vynikající výkon v oblasti retence a selektivity polarních sloučenin.

Reference

Shimadzu Corporation. Application News L578 (JP, ENG), First Edition, December 2021, ERAS-1000-0165A.