Analysis of Fat Soluble Vitamins Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column

Význam tématu

Analýza vitamínů rozpustných v tucích je klíčová pro kontrolu kvality potravin a doplňků stravy. Tyto látky se v matrice potravin vyskytují v nízkých koncentracíchřádu μg/100 g a často v přítomnosti interferujících látek s podobnými vlastnostmi. Spolehlivá separace a kvantifikace je proto nezbytná k zajištění správného označení obsahu vitamínů a kontroly dodržení výživových norem.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikční poznámky bylo demonstrovat použití HPLC kolonky Thermo Scientific Accucore RP-MS založené na Core Enhanced Technology pro rychlou a vysoce účinnou separaci pěti hlavních vitamínů rozpustných v tucích (A, K, D3, E a acetát E). Studie klade důraz na rychlost analýzy, opakovatelnost a kvalitu tvaru píků.

Použitá metodika

Metoda využívá izokratickou eluci s mobilní fází acetonitril : methanol (75 : 25 v/v). Kolonka o rozměrech 100×2,1 mm a částečně porézních částicích 2,6 µm nabízí nízký tlakový spád při zachování vysoké účinnosti. Analýzu provádí injekcí objemu 2 µl při průtoku 0,4 ml/min a teplotě 30 °C. Detekce probíhá UV absorbancí při 280 nm.

Použitá instrumentace

• Kolonka Accucore RP-MS 2,6 µm 100×2,1 mm
• HPLC systém s UV detektorem nastaveným na 280 nm
• Solventy HPLC kvality : acetonitril a methanol
• Clear vial 2 ml s PTFE silikonovým víčkem

Hlavní výsledky a diskuse

Separační výkon umožnil rozdělení všech pěti vitamínů během tří minut. Reprodukovatelnost retenčních časů (n=6) vykázala relativní směrodatnou odchylku pod 1 % pro všechny sloučeniny. Tvar píků ukázal symetrie v rozsahu 1,14 až 1,34, což indikuje minimální roztažení a špičatost.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí značné zkrácení doby analýzy při zachování vysoké účinnosti a robustnosti. Nízký tlakový spád umožňuje provoz na běžných HPLC systémech bez nutnosti použití vysoce tlakových komponent. Analýza při pokojové teplotě chrání citlivé vitamíny před degradací.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření Core Enhanced Technology i na další třídy analytů včetně polárních i nepolárních látek. Integrace s hmotnostní spektrometrií by mohla zvýšit selektivitu a citlivost. Dále je reálná automatizace přípravy vzorků a využití v on-line monitoringu výrobních procesů.

Závěr

Použití Accucore RP-MS kolonek pro analýzu vitamínů rozpustných v tucích bylo prokázáno jako rychlé, účinné a reprodukovatelné řešení. Metoda vhodně kombinuje vysokou kvalitu separace s minimálním provozním zatížením HPLC systému.

Reference

• Meadows K. Analysis of Fat Soluble Vitamins Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column. Thermo Fisher Scientific Application Note 20585, 2012.