Separation of Metformin and Voglibose Using a Thermo Scientific Accucore HILIC HPLC Column

Význam tématu

Separační analýza vysoce polárních léčiv metforminu a voglibosu je klíčová pro kvalitativní a kvantitativní kontrolu farmaceutických přípravků a pro bioanalytické studie. Efektivní rozlišení těchto látek umožňuje rychlé stanovení koncentrací v dávkách kombinovaných terapií i v biologických matricích.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout robustní a rychlou chromatografickou metodu pro kvalitativní separaci metforminu a voglibosu v kombinovaných vzorcích pomocí HILIC režimu a hmotnostní spektrometrie. Použit byl sloupcový materiál Accucore HILIC 2,6 µm s optimalizovanou fází pro potlačení vedlejších interakcí.

Použitá metodika

Vzorky metforminu a voglibosu byly připraveny jako 1 mg/mL roztoky v metanol/voda (50:50, v/v) a ředěny na pracovní směs 1 µg/mL metforminu a 2 µg/mL voglibosu v acetonitril/voda/kyselina mravenčí 85:15:0,1 (v/v/v). Chromatografie probíhala při průtoku 0,4 mL/min s mobilní fází skládající se z 100 mM formiátu amonného v poměru 17:83 (v/v) s pH 3,2. Teplota kolony byla ambientní, objem injekce 5 µL, doba analýzy pod 3,5 minuty.

Použitá instrumentace

• Pumpa Thermo Scientific Accela 1250
• Autosampler Thermo Scientific Accela Open
• Kolona Accucore HILIC 2,6 µm, 50 × 2,1 mm
• Detektor Thermo Scientific TSQ Vantage (HESI-II, pozitivní ionizace)
• Software Thermo Scientific LCQuan v. 2.6, integrace ICIS

Hlavní výsledky a diskuse

Metformin a voglibose byly separovány s retenčními časy 1,05 min (K′=2,9, %RSD 0,42) a 1,96 min (K′=6,3, %RSD 0,52). Vysoká účinnost, nízké zkreslení a reprodukovatelnost potvrzují vhodnost Accucore HILIC fází pro krátké analýzy polárních sloučenin s MS detekcí.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Rychlé zpracování pod 3,5 minuty
• Vysokou opakovatelnost retence a špičkového tvaru
• Vysokou citlivost díky MS detekci
• Možnost rozšíření na další polární analyty

Budoucí trendy a možnosti využití

Další aplikace mohou zahrnovat:

1. Transfer metody na UHPLC a vysokorychlostní separace
2. Integraci s HRMS pro strukturální identifikaci metabolit
3. Rozšíření na analýzu biologických vzorků (plazma, sérum)
4. Automatizaci přípravy vzorků v online režimu

Závěr

Vyvinutá HILIC-MS metoda na kolóně Accucore prokazuje vynikající výkon při separaci metforminu a voglibosu. Minimalizuje dobu analýzy, zachovává vysokou účinnost a stabilitu, což je klíčové pro farmaceutickou kontrolu a bioanalýzu polárních antidiabetik.

Reference

1. Chen X, Zheng Y, Shen Y. Curr Med Chem. 2006;13:109–116.
2. Kawamori R, Tajima N, Iwamoto Y, Kashiwagi A, Shimamoto K, Kaku K. Lancet. 2009;373:1607–1614.
3. Revathi P, Senthinath J, Shyam KP. Int J Med Res. 2011;1(2):121–129.