UV Method for the Determination of Tricyclic Antidepressants’ from Human Plasma Using SOLA CX and Hypersil GOLD HPLC

Význam tématu

Tricyklická antidepresiva se i nadále používají v klinických studiích a vyžadují spolehlivou kvantifikaci v komplexních matricích, jako je lidská plazma. Díky své účinnosti a širokému využití je klíčové aplikovat metody s vysokou přesností, opakovatelností a nízkými nároky na vzorek a rozpouštědla, čímž se zvyšuje kvalita a efektivita bioanalytických postupů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikované poznámky je představit UV metodu založenou na extrakci čtyř tricyklických antidepresiv ze vzorků lidské plazmy pomocí SOLA CX kazet a jejich následné separaci na kolóně Hypersil GOLD v rámci HPLC. Studie demonstruje výkon metody, její přesnost, návratnost a rychlost analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Extrahovaná látka: doxepin, imipramin, amitriptylin, trimipramin (IS)
• Matrix: lidská plazma
• SPE kazeta: SOLA CX 10 mg/1 mL
• Kondicionace: 500 µL methanolu, 500 µL vody
• Aplikace vzorku: 450 µL směsi plazmy a 100 mM fosfátového pufru (pH 6,0)
• Vymyvání: 500 µL vody s 0,1 % kyseliny mravenčí, 500 µL methanolu s 0,1 % kyseliny mravenčí
• Eluce: 500 µL acetonitrilu s 5 % amoniaku
• Suché vysušení bez zahřívání, znovu rozpouštění v 150 µL 80:20 voda/acetonitril

Instrumentace:

• Extrakce: SOLA CX kazety Thermo Scientific
• HPLC: Thermo Scientific Accela 600
• Kolona: Hypersil GOLD, 3 µm, 150 × 2,1 mm
• Mobilní fáze: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí / acetonitril + 0,1 % kyseliny mravenčí (70:30 v/v)
• Průtok: 0,4 mL/min
• Teplota kolony: 30 °C
• Objem injekce: 1 µL

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny čtyři tricyklická antidepresiva se separovala za méně než 8 minut s návratností nad 70 % pro každý analy­t a s procentuální odchylkou (RSD) menší než 5 %. Chromatogramy vykazují ostré a symetrické píky, což potvrzuje vysoce čistý extrakt a efektivitu použitých fází.

Přínosy a praktické využití metody

Popisovaná metoda přináší vysokou opakovatelnost a čistotu vzorků při současném snížení spotřeby rozpouštědel. Díky kratšímu času přípravy a zvýšené průchodnosti je ideální pro rutinní bioanalytická a klinická pracoviště, kde je kladen důraz na rychlost, spolehlivost a ekonomii provozu.

Budoucí trendy a možnosti využití

V budoucnu lze rozšířit aplikaci SOLA CX a Hypersil GOLD fází na další farmakokinetické studie a detekci stopových látek v různých biologických matricích. Integrace s hmotnostní spektrometrií, miniaturizace SPE kroků a automatizace mohou dále zvýšit citlivost, efektivitu a variabilitu analýz.

Závěr

SOLA CX SPE kazety v kombinaci s kolónou Hypersil GOLD a HPLC Accela 600 poskytují robustní, rychlou a citlivou metodu pro extrakci a analýzu tricyklických antidepresiv v lidské plazmě. Metoda potvrzuje vysokou přesnost, reprodukovatelnost a úsporu rozpouštědel, což ji činí výhodnou pro široké bioanalytické aplikace.

Reference

V dokumentu nebyl uveden seznam literatury.