HPLC-UV Method for the Determination of Procainamide from Human Plasma Using SOLA CX

Význam tématu

Procainamid je široce používaný antiarytmický lék a jeho přesné stanovení v lidské plazmě je klíčové pro monitorování terapeutických koncentrací, zajištění bezpečnosti pacienta a farmakokinetické studie. Souběžné sledování sulfanilamidu jako interního standardu zvyšuje spolehlivost kvantifikace. Efektivní a reprodukovatelná příprava vzorku v bioanalytických laboratořích urychluje diagnostiku a zefektivňuje výzkumné a klinické postupy.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout robustní HPLC-UV metodu pro stanovení procainamidu a sulfanilamidu v lidské plazmě. Metoda kombinuje pevné fáze extrakci pomocí inovativních SOLA CX kazet s reverzní chromatografií na C18 kolóně. Studie porovnává výkonnost SOLA CX kazet s klasickými volně balenými SPE produkty a hodnotí účinnost extrakce, reproducibilitu a rychlost analýzy.

Použitá metodika

Vzorky lidské plazmy byly napuštěny procainamidem a sulfanilamidem jako interním standardem. Připravené vzorky prošly dvěma způsoby SPE:

• SOLA CX kazeta (10 mg/1 mL): kondicionace methanolem a vodou, aplikace 250 µL vzorku, dvojí fáze mytí (voda s 2 % kyselinou formiovou, methanol s 2 % kyselinou formiovou) a eluční fáze (methanol s 5 % amoniakem). Suchý zbytek byl rekonstituován ve 250 µL vody.
• Volně balená SPE: obdobný postup s dvojnásobným objemem (500 µL) vzorku a mycích/elučních fází.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Thermo Scientific s UV detektorem nastaveným na 277 nm
• Kolona Syncronis C18 5 µm, 100 × 4,6 mm
• Mobilní fáze A: 20 mM acetát amonný, B: methanol; gradient od 5 % do 95 % B (0–5 min), zpětný návrat do 5 % B do 5,6 min, doba běhu 8 min, průtok 1 mL/min, teplota kolony 30 °C

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografické oddělení sulfanilamidu (IS) a procainamidu proběhlo do 5 min. Výsledky šesti replikátů ukázaly:

• SOLA CX: průměrné zotavení 77,8 % pro IS (RSD 11,0 %) a 119 % pro procainamid (RSD 4,03 %).
• Volně balená SPE: zotavení 97,3 % pro IS (RSD 21,0 %) a 106 % pro procainamid (RSD 10,7 %).

Metoda se vyznačuje vyšší přesností pro procainamid a nižší spotřebou rozpouštědel při použití SOLA CX, přestože zotavení IS bylo mírně nižší. Celkově poskytuje vysokou reprodukovatelnost a zkrácený čas přípravy.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Rychlou a reprodukovatelnou přípravu vzorku s nízkou spotřebou organických rozpouštědel.
• Vysokou propustnost v bioanalytických a klinických laboratořích.
• Snížení variability výsledků a nákladů na analýzu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat integraci SPE kazet SOLA CX do plně automatizovaných systémů, rozšíření metody na další léčivé látky či metabolity a kombinaci s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení citlivosti a selektivity. Možné aplikace v terapeutickém monitorování a farmakokinetických studiích nabízí širší uplatnění v personalizované medicíně.

Závěr

Vyvinutá HPLC-UV metoda s SPE SOLA CX kazetami umožňuje rychlé a reprodukovatelné stanovení procainamidu a sulfanilamidu v lidské plazmě. Metoda dosahuje srovnatelné až lepší přesnosti než konvenční SPE, zkracuje čas přípravy a snižuje spotřebu rozpouštědel, a je vhodná pro vysoce propustné bioanalytické aplikace.

Reference

Žádné literární reference uvedeny.