Fast, Reproducible LC-MS/MS Analysis of Dextromethorphan and Dextrorphan

Význam tématu

Vývoj citlivé a rychlé LC-MS/MS metody pro stanovení dextromethorfanu a dextrorfanu v plazmě potkanů usnadňuje farmakokinetické a metabolické studie, včetně rozlišení rychlých a pomalých metabolizérů.

Cíle a přehled studie

Tento dokument popisuje vysoce reproducibilní protokol s kvantifikačním limitem 0,1 ng/mL, využívající solid-phase extrakci Thermo Scientific SOLA CX a akcelerační Accucore C18 kolonu s 2minutovým cyklem.

Použitá metodika

Vzorky potkaní plazmy byly obohaceny interním standardem (dextromethorphan-d3), extrahovány na SOLA CX SPE destičkách, omyty a eluovány 5 % amoniaku v methanolu. Suché extrakty byly rekonstituovány v acetonitril:vodě (50:50). Chromatografie probíhala na Accucore C18 (50×2,1 mm, 2,6 μm) při 40 °C s gradientem 5–95 % acetonitrilu a průtokem 1,4 mL/min.

Použitá instrumentace

• Dionex UltiMate 3000 RSLC HPLC systém
• Accucore C18 2,6 μm kolona, 50 × 2,1 mm
• TSQ Vantage MS s HESI zdrojem
• Thermo Scientific SOLA CX SPE destičky
• Thermo Scientific UltraVap rotační vysoušeč

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala lineární rozsah 0,1–100 ng/mL s r2 ≥ 0,998. LLOQ 0,1 ng/mL, přesnost zpětně vypočtených hodnot ≤ 14 % odchylky, preciznost QC vzorků ≤ 8 % CV. Obnovení extrakce dosahovalo 95–102 % a matriční suprese byla velmi nízká (< 8 %).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou propustnost díky 2minutovému cyklu, minimální spotřebu rozpouštědel, vynikající návratnost a stabilní výkon, vhodná pro bioanalytické a klinické laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření na další biologické matrice, vývoj multiplexních metod, plná automatizace SPE, nasazení ultrarychlých chromatografických systémů a integrace s vysokorozlišovacími hmotnostními spektrometry.

Závěr

Kombinace SOLA CX SPE a Accucore C18 kolony umožňuje rychlé, citlivé a reprodukovatelné stanovení dextromethorfanu a dextrorfanu v plazmě, s vysokou přesností a minimálními matričními interferencemi.