Evaluation of intra- and inter-system precision for HPLC analysis of active pharmaceutical ingredients and impurities

Význam tématu

V oblasti farmaceutické analýzy je vysoký stupeň reprodukovatelnosti výsledků klíčový pro zajištění kvality léčiv. S rostoucím důrazem na efektivní převod analytických metod mezi laboratořemi a systémy je nutné ověřit, zda různé přístroje poskytují ekvivalentní údaje. Studie se zaměřuje na přesnost HPLC analýzy API a jejich nečistot napříč šesti identickými systémy.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo kvantitativně vyhodnotit intra- a inter-systémovou variabilitu u šesti Thermo Scientific Vanquish Core HPLC systémů za přísně kontrolovaných podmínek. Studie zahrnuje dvě farmaceutické aplikace:

• Application 1: gradientní stanovení nevirapinu a jeho nečistot podle dříve publikované metody.
• Application 2: izokratické a gradientní stanovení acetaminofenu a pěti souvisejících nečistot podle monografie USP.

Použitá metodika

Pro každou aplikaci byly připraveny standardní a pracovní roztoky API a nečistot. Deset po sobě následujících injekcí vzorků bylo provedeno na každém systému, přičemž před a po sérii byly zařazeny blank vzorky. Všechny proměnné (mobilní fáze, vzorky, kolony, teplota) byly stejným operátorem čerstvě připraveny a mezi systémy přenášeny postupně ve dvojicích, aby se minimalizoval čas experimentu a vliv stárnutí roztoků.

Použitá instrumentace

• Vanquish Core System Base (VC-S01-A)
• Vanquish Quaternary Pump C (VC-P20-A)
• Vanquish Sampler CT (VC-A12-A)
• Vanquish Column Compartment C (VC-C10-A-03)
• Vanquish Variable Wavelength Detector C (VC-D40-A) se standardní tlakovou kyvetou
• Chromeleon CDS software v7.3
• Thermo Scientific Acclaim Polar Advantage II, 150 × 3 mm, 3 µm
• Thermo Scientific Hypersil GOLD C8, 4.6 × 100 mm, 3 µm

Hlavní výsledky a diskuse

Prvním krokem bylo ověření shody holého objemu systému (void volume), které ve všech šesti přístrojích dosáhlo 42–43 µL. Intra-systémová přesnost ukázala hodnoty RSD retence 0,01–0,12 % a RSD plochy 0,05–0,31 % pro vybrané analyty. Inter-systémové RSD výsledků retention time bylo <1 % a RSD plochy a relativní plochy <2,5 % pro všechny sledované sloučeniny. Nízká variabilita mezi přístroji potvrzuje robustnost Vanquish Core systémů i při náročných gradientních i izokratických separacích.

Přínosy a praktické využití metody

Studie prokazuje, že laboratoř standardizovaná na Vanquish Core HPLC systémy může očekávat vysokou reprodukovatelnost analytických výsledků napříč více jednotkami. To výrazně zjednodušuje převod metod mezi pracovišti, zkracuje dobu validace a snižuje náklady na opakované kalibrace a kontrolní testy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření podobných srovnávacích studií lze očekávat s vyšším počtem systémů, širší škálou API a komplexnějšími metodami (UHPLC-MS, kapalinová chrakterizace makromolekul). Integrace umělé inteligence a prediktivní údržby by mohla dále automatizovat detekci odchylek a plánovat servisní zásahy.

Závěr

Šesti Vanquish Core HPLC systémům byla prokázána vynikající intra- i inter-systémová přesnost pro analýzu nevirapinu, acetaminofenu a jejich nečistot. Výsledky potvrzují vysokou shodu holého objemu, nízkou variabilitu retence a plochy a podporují efektivní převod metod ve farmaceutické analytice.

Reference

1. Thermo Fisher Scientific Technical Note 73337: Global round robin test of thiopental EP method performance on identical HPLC systems, 2019.
2. Thermo Fisher Scientific Technical Note 73915: Complete workflow for determining the content of nevirapine and related impurities, 2021.
3. United States Pharmacopeia USP40-NF35 S2, Acetaminophen method, The United States Pharmacopeial Convention, 2017.
4. United States Pharmacopeia USP40-NF35 S1, Nevirapine method, The United States Pharmacopeial Convention, 2017.
5. Thermo Fisher Technical Note 73786: Long-term robustness of thiopental Ph. Eur. Method performance on modern HPLC instrumentation, 2020.