Agilent MassHunter Optimizer - Quick Start Guide

Význam tématu

Automatizovaná optimalizace hmotnostně‐spektrálních metod je klíčová pro rychlé a reprodukovatelné nastavení parametrů v režimu MRM (multiple‐reaction monitoring) na triple quadrupole spektrometrech. MassHunter Optimizer přináší automatické volby prekurzorových a produktových iontů, nastavení fragmentačního napětí a kolizní energie, čímž výrazně šetří čas oproti manuálnímu přístupu a zvyšuje konzistenci výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem Quick Start Guide je představit uživateli kroky potřebné k rychlému spuštění MassHunter Optimizeru, včetně instalace, založení projektů, nastavení optimalizačních parametrů, definice seznamu sloučenin či peptidů a importu výstupů do analytických metod. Text systematicky popisuje práci s uživatelským rozhraním, databází a výsledky optimalizace.

Použitá metodika a instrumentace

Optimalizace probíhá postupně ve čtyřech fázích: SIM scan pro určení nejlepšího napětí fragmentoru, full‐scan produktových iontů pro výběr kandidátů, MRM scan pro optimalizaci kolizní energie a závěrečná validace produktových iontů. Podporovaná instrumentace zahrnuje Agilent triple quad (včetně modelů 6490/6495), infúzní systémy (ruční i automatickou), LC kolony či tubing. Data jsou ukládána a vizualizována v MassHunter Qualitative Analysis.

Hlavní výsledky a diskuse

• Automatická selekce prekurzorových aduktů (+H, +Na, +K, +NH4) šetří až desítky hodin manuální práce.
• Nastavení fragmentoru a kolizní energie pomocí rampování s možností jemné optimalizace přinese maximální intenzitu iontů.
• Výsledky lze rychle zhodnotit v Ion Breakdown Profile grafu, kde lze manuálně korigovat kolizní energii.
• Podpora sekvenční optimalizace peptidů s predikcí fragmentů zpřístupňuje platformu pro proteomické aplikace.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace MassHunter Optimizeru usnadňuje rychlé přidání nových analytů do laboratorního portfolia, zajišťuje konzistentní citlivost a selektivitu MRM metod a umožňuje export optimalizačních parametrů přímo do MassHunter Data Acquisition. Databázové řešení poskytuje přehled o již optimalizovaných sloučeninách a podporuje jejich opakované použití v budoucích projektech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření podpory pro vysokofrekvenční dynamické MRM (dMRM) a spouštěné MRM (tMRM), lepší integrace s databázemi biopolymerů a cloudovými úložišti, pokročilá predikce kolizních energií pomocí strojového učení a automatizované generování metod pro komplexní biologické vzorky.

Závěr

MassHunter Optimizer představuje výkonné nástroje pro automatizovanou optimalizaci MRM metod na triple quadrupole spektrometrech. Rychlé nastavení, databázová správa optimalizačních výsledků a přímý import do akvizičních metod výrazně zvyšují produktivitu a opakovatelnost analytických postupů.

Reference

Agilent Technologies Inc. MassHunter Optimizer Quick Start Guide, Revision B, May 2016, G3793-90008.