Illustration of the Analytical Performance of the Waters MassTrak Endocrine Steroid Calibrators and QC Set Using the ACQUITY UPLC I-Class and Xevo TQ-S micro Mass Spectrometer

Význam tématu

Stanovení hladin steroidních hormonů v lidské krvi je nezbytné pro diagnostiku endokrinních poruch, sledování léčebných režimů a výzkum metabolických drah. Vysoká selektivita a citlivost LC-MS/MS metod umožňuje spolehlivé rozlišení strukturálně podobných sloučenin a přesné kvantifikace i při nízkých koncentracích v komplexních biologických matricích.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo ověřit analytické parametry nově vyvíjené sady kalibrátorů a kontrolních vzorků MassTrak Endocrine Steroid Calibrator and QC Set (IVD) v kombinaci se systémem Waters ACQUITY UPLC I-Class a Xevo TQ-S micro IVD. Studie se zaměřila na hodnocení linearity, citlivosti, přesnosti, opakovatelnosti a biasu pro 12 endokrinních steroidů.

Použitá metodika a instrumentace

Sample preparation:

• 125 µL séra s interním standardem a methanolem, ředění vodou, centrifugace
• Oasis MAX µElution SPE: nanesení, promytí, eluování do sběrného talířku

Chromatografie:

• Kolona CORTECS C8 (2,1×100 mm, 2,6 µm) s VanGuard pre-kolonou
• Mobilní fáze A: 0,1 mM amonného fluoridu ve vodě; B: 0,1 mM amonného fluoridu v methanolu
• Gradient od 40 % do 95 % fáze B za 6 min
• Průtok 0,3 mL/min

Spektrometrie:

• Xevo TQ-S micro, režim MRM, rozlišení MS1 0,75 FWHM, MS2 0,5 FWHM
• Ionizace ESI (pozitivní i negativní mód)

Software:

• MassLynx IVD v4.2
• TargetLynx XS Application Manager

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární rozsahy pro jednotlivé hormony pokrývaly klinicky relevantní koncentrace s koeficientem determinace r2 > 0,99. Citlivost systému umožnila detekci nízkých ng/mL úrovní s poměrem signál/šum nad 10:1. Celková přesnost (bias) vůči referenčním hodnotám EQA se pohybovala v rozmezí ±10 %, opakovatelnost RSD QC vzorků byla nižší než 8 %. Výsledky potvrzují selektivní chromatografické rozlišení i při simultánním měření 12 steroidů.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda kombinuje rychlou přípravu vzorku, vysoký objemnost analýz a robustní detekci, což je výhodné pro klinické laboratoře i výzkumná centra. Umožňuje komplexní profilaci steroidního spektra v séru s minimální požadavkem na objem vzorku.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků a integrace s laboratořskými informačními systémy
• Rozšíření panelu o další biologicky aktivní metabolity a konjugáty
• Miniaturizace a vysokopropustné formáty pro screening velkých souborů vzorků
• Využití datové analýzy a strojového učení pro rychlejší interpretaci výsledků

Závěr

Testovaná kombinace kalibrátorů MassTrak Endocrine Steroid Calibrator and QC Set (IVD) se systémem ACQUITY UPLC I-Class a Xevo TQ-S micro IVD prokazuje vynikající analytické vlastnosti pro kvantifikaci endokrinních steroidů v lidském séru. Metoda nabízí vysokou citlivost, selektivitu a reprodukovatelnost, což ji předurčuje k aplikacím v klinické diagnostice a výzkumu.

Reference

Žádné externí literární zdroje nebyly v textu uvedeny.