LC-MS/MS ANALYSIS OF AMINOGLYCOSIDES IN FOODS BY ZWITTERIONIC HYDROPHILIC INTERACTION CHROMATOGRAPHY

Význam tématu

Aminoglykosidy představují významnou skupinu antibiotik s klíčovým uplatněním v léčbě gramnegativních bakteriálních infekcí a zároveň se využívají jako růstové promotory v živočišné produkci. Jejich vysoká polarita a široké uplatnění ve veterinární a potravinářské praxi vyžadují citlivé a spolehlivé analytické metody pro detekci reziduí v potravinových matricích.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce je vyvinout a optimalizovat LC-ESI-MS/MS metodu pro simultánní stanovení 15 běžných aminoglykosidů v medu, mléce, svalové tkáni (hovězí, vepřová) a drůbežích játrech s využitím nové Atlantis Premier BEH Z-HILIC kolony se sulfobetaine stacionární fází.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: Med, mléko, hovězí a vepřová svalovina, drůbeží játra.
• Extrakce: 3 g vzorku bylo extrahováno 20 ml roztoku (10 mmol/l amonium acetát, 0,4 mmol/l EDTA, 0,5 % NaCl, 2 % TCA), poté po odstředění očištěno SPE Oasis HLB kartridžemi.
• Chromatografie: Kolona Atlantis Premier BEH Z-HILIC (2,5 μm, 2,1 × 150 mm), teplota 50 °C; mobilní fáze A: 20 mmol/l amonium formiát (pH 3,0), B: 0,1 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu; gradient z 20 % A na 95 % A za 5 min a udržení 10 min.
• Detekce: Hmotnostní spektrometr Xevo TQ-S micro v pozitivním režimu (ES+), kapilární napětí 1,5 kV, teplota zdroje 150 °C, desolvační teplota 600 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

• Rozlišení všech 15 aminoglykosidů během 10min chromatografického běhu s vysokou kvalitou píků.
• Optimální pH 3,0 a koncentrace pufru 20 mmol/l zajistily vyvážený poměr retence, tvaru a intenzity signálu.
• SPE Oasis HLB poskytla recovery ve dvourozmezí přibližně 70–120 % pro 14 z 15 testovaných aminoglykosidů napříč matricemi.
• LOQ dosahovaly 10–100 μg/kg v závislosti na analytech a matrici; lineární rozsah byl až do 2500 μg/kg s R2 > 0,995.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda umožňuje rychlé screenování i kvantifikaci aminoglykosidů pod hranicí stanovených MRL. Je vhodná pro rutinní QA/QC analýzy reziduí antibiotik v potravinách a lze ji snadno implementovat v kontrolních laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření aplikace Z-HILIC fází na další polarizovatelné sloučeniny a environmentální vzorky. Perspektivní je integrace s vysokým rozlišením (HRMS), miniaturizace SPE procesů, používání zelených rozpouštědel a automatizace přípravy vzorků.

Závěr

LC-ESI-MS/MS metoda s Atlantis Premier BEH Z-HILIC kolonou poskytuje rychlý, selektivní a vysoce citlivý přístup ke stanovení aminoglykosidů v potravinách. Splňuje nároky na přesnost, reprodukovatelnost a citlivost potřebné pro bezpečnostní kontrolu potravin.