Detection of Low-Level Impurities in Salbutamol Using the Agilent 1260 Infinity II SFC System with a Variable Wavelength Detector

Význam tématu

Detekce stopových organických nečistot v aktivních farmaceutických složkách je zásadní pro zajištění kvality a bezpečnosti léčiv. Salbutamol sulfát, široce používaný bronchodilatátor, má stanovenou mezní hodnotu známých nečistot stanovenou Evropskou farmacopoeou, proto je nutné vyvinout citlivou a rychlou analytickou metodu pro jejich monitorování.

Cíle a přehled studie

Cílem této aplikace bylo demonstrovat schopnost systému Agilent 1260 Infinity II SFC vybaveného variabilním vlnovým detektorem (VWD) detekovat a kvantifikovat nízké hladiny nečistot B, D, F, G a I v salbutamol sulfátu na úrovni 0,2–0,4 % API. Studie byla součástí mezilaboratorního kola a porovnávala výkonnost metody se standardní HPLC monografií Evropské farmacopoeie.

Použitá metodika a instrumentace

Pro dosažení vysoké rychlosti a citlivosti byla použita superkritická tekutá chromatografie (SFC) s následujícími podmínkami:

• Instrumentace: Agilent 1260 Infinity II SFC Control Module, Binary Pump, Multisampler, Multicolumn Thermostat a 1260 Infinity II Variable Wavelength Detector (10 mm HPP flow cell).
• Fáze: hybridní křemík s chemisorbovaným diethylaminem (100 × 3,0 mm, 1,7 µm).
• Mobilní fáze: CO₂ + 0,1 % amoniaku v methanolu, gradient 3 %–35 % B v 6,5 min; průtok 1,5 mL/min, tlak 135 bar.
• Teplota kolony: 55 °C, postkolona 38 °C, autosampler 6 °C.
• Detekce: VWD při 220 nm, rychlost 20 Hz.
• Příprava vzorku: zásobní a meziroztoky standardů nečistot a salbutamolu, kalibrace na úrovních 4, 6 a 8 µg/mL, QC 6 µg/mL, tří nezávislá opakování.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožňuje separaci salbutamolu a pěti zkoumaných nečistot během 7 min, což je sedmkrát rychlejší než monografie HPLC. Retenční doby vykazují RSD <0,03 % a špičkové plochy RSD <2 % (u pozdní nečistoty F 2,09 %). Kalibrační křivky pro nečistotu D jsou vysoce lineární (R² 0,997–1,000) a QC ukazuje návratnost 98,9 %. Intradení opakovatelnost kvantifikace nečistoty D je na úrovni 1 % RSD, mezidení přesnost mezi 0,44 % a 1,76 % RSD.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Výrazné zkrácení doby analýzy proti klasické HPLC.
• Vysokou opakovatelnost retenčních dob a plošných integrálů.
• Citlivé sledování nízkých obsahů nečistot ve farmaceutických API.
• Možnost rozšíření do laboratorní praxe pro QA/QC v různých průmyslových odvětvích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k širším mezilaboratorním srovnáním, integraci hmotnostní detekce, aplikaci metody na jiné API včetně chirálních sloučenin, optimalizaci „zelené“ chromatografie a miniaturizaci instrumentace pro vysokou průchodnost.

Závěr

Agilent 1260 Infinity II SFC s VWD prokázal robustní, rychlou a citlivou analýzu nízkých hladin nečistot v salbutamolu. Metoda splňuje farmaceutické požadavky na přesnost i opakovatelnost a představuje atraktivní alternativu k tradiční HPLC v kontroly kvality API.

Reference

1. Roy J. Pharmaceutical impurities: A mini-review. AAPS PharmSciTech. 2002;3(2):1–8.
2. ICH Harmonised Tripartite Guideline Q3B(R2): Impurities in New Drug Products. 2006.
3. Dispas A., Marini R., Desfontaine V. First inter-laboratory study of supercritical fluid chromatography method for the determination of pharmaceutical impurities. J Pharm Biomed Anal. 2018;161:414–424.
4. Dispas A., Guillarme D., Naegele E., Kutscher D. Quantitative determination of salbutamol sulfate impurities using achiral supercritical fluid chromatography. J Pharm Biomed Anal. 2017;134:170–180.
5. Dispas A., et al. Interlaboratory study of a supercritical fluid chromatography method for the determination of pharmaceutical impurities: Evaluation of multi-systems reproducibility. J Pharm Biomed Anal. 2021;203:114206.