Orthogonal Separation of Pharmaceutical Impurities by the Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC Hybrid System

Význam tématu

Monitorování a identifikace stopových nečistot v aktivních farmaceutických složkách je klíčové pro splnění mezinárodních regulačních požadavků a zajištění kvality a bezpečnosti léčiv. Ortogonální kombinace separačních metod, jako jsou UHPLC a SFC, významně rozšiřuje schopnost detekce a identifikace různých typů nečistot.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této Application Note je ukázat, jak lze s hybridním systémem Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC vybaveným VWD detektorem detekovat nízkoúrovňové nečistoty v API metoclopramidu. Studie porovnává selektivity UHPLC a SFC režimu a demonstruje výhody ortogonálního přístupu.

Použitá metodika a instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II SFC Control Module (G4301A)
• Agilent 1260 Infinity II SFC Binary Pump (G4782A)
• Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler (G4767A)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat s Quick Change 8-sloupcovým ventilem (G7116B, G4239C)
• Agilent 1260 Infinity II Quaternary Pump (G7111B)
• Agilent 1290 Infinity Valve Drive (G1170A, G4232C)
• Agilent 1260 Infinity II Variable Wavelength Detector s vysokotlakou flow buňkou (G7114A, G1314-60182)
• Software: Agilent OpenLab CDS ChemStation Edition Rev. C.01.08
• UHPLC mobilní fáze: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí a acetonitril + 0,1 % kyseliny mravenčí, gradient 5–45 % B
• SFC mobilní fáze: CO2 a methanol + 10 mM amonný formiát, gradient 1–70 % B
• Sloupce: UHPLC ZORBAX SB-C18 3,0×100 mm, 1,8 µm při 30 °C; SFC ZORBAX Rx-SIL 3,0×100 mm, 1,8 µm při 55 °C, BPR 150 bar

Hlavní výsledky a diskuse

• V UHPLC režimu bylo separováno několik degradací nečistot (B, C, D) od API, ale nečistota A zůstala skrytá pod hlavním píkem a nečistota G nebyla dostatečně základnově oddělena pro kvantifikaci.
• V SFC režimu se dosáhlo lepší ortogonální selektivity: degradace nečistot B, C, D elutují mezi 1,5–2,7 min, nečistoty A a G a API mezi 4,0–6,2 min, což umožnilo jejich jasné rozlišení.
• Pro stopovou hladinu 0,03 % byly dosaženy poměry signál/šum výrazně nad S/N = 3, RSD retenčních časů < 0,2 % a RSD ploch < 2 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá přepínatelnost mezi SFC a UHPLC pro ortogonální screening nečistot.
• Vyšší citlivost a selektivita při detekci stopových nečistot.
• Splnění požadavků ICH Q3B(R2) pro analýzu nízkoúrovňových nečistot.
• Vhodné pro vývoj a validaci analytických postupů v QA/QC laboratořích farmaceutického průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Hybridní systémy SFC/UHPLC budou nadále rozšiřovat možnosti komplexní analýzy farmaceutických látek. Očekává se další vývoj v oblasti vysoce citlivých detektorů, automatizace metodického vývoje a využití umělé inteligence pro optimalizaci separací a identifikaci dosud neznámých nečistot.

Závěr

Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC Hybrid System s VWD detektorem prokázal vysokou výkonnost při detekci nízkoúrovňových nečistot v metoclopramidu. Ortogonální separace SFC versus UHPLC rozšířila selektivitu, což vedlo k spolehlivé detekci nečistot až na úrovni 0,03 % s vynikající reprodukovatelností.

Reference

1. ICH Harmonized Tripartite Guideline Q3B(R2): Impurities in New Drug Products
2. Agilent Application Note 5994-1351EN: Improved Sensitivity for Low-Level Impurity Detection with the Agilent 1260 Infinity II SFC System
3. Agilent Technical Overview 5991-8276EN: Orthogonal Chromatographic Separations using the Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC Hybrid System