Simultaneous, Sensitive LC/MS Analysis of Plasma Metanephrines
Aplikace | 2013 | WatersInstrumentace
Analýza plazmatických metanephrinů je klíčová pro výzkum a diagnostiku neuroendokrinních onemocnění, jako je feochromocytom. Vysoce citlivní a simultánní stanovení metanephrinu, normetanephrinu a 3-methoxytyraminu zkracuje čas přípravy vzorků a zvyšuje spolehlivost výsledků.
Cílem bylo vyvinout a ověřit LC/MS metodu s online SPE pro současné měření tří biogenních aminů v plazmě s vysokou citlivostí a selektivitou vhodnou pro klinický výzkum.
Instrumentace:
Metoda umožňuje oddělení 3-methoxytyraminu před metanephrinem a normetanephrinem, čímž eliminuje izobarické rušení a iontový crosstalk. Online SPE prokázala 100% recovery bez průsaků či adsorpce. Kalibrační křivky měly koeficient determinace r2 > 0,999. LLOQ jsou v rozmezí 0,0375–0,075 nmol/l, což zajišťuje měření i velmi nízkých koncentrací.
Metoda nabízí:
Očekává se integrace této metodiky do rutinních diagnostických sad, rozšíření panelu analyzovaných metabolitů, automatizace přípravy vzorků a využití vysoce rozlišovací MS pro širší metabolomické profily.
Vyvinutá LC/MS metoda s online SPE je spolehlivá, citlivá a efektivní pro souběžné stanovení metanephrinu, normetanephrinu a 3-methoxytyraminu v plazmě. Umožňuje rychlou přípravu vzorků a přesné kvantifikace nízkých koncentrací.
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Analýza plazmatických metanephrinů je klíčová pro výzkum a diagnostiku neuroendokrinních onemocnění, jako je feochromocytom. Vysoce citlivní a simultánní stanovení metanephrinu, normetanephrinu a 3-methoxytyraminu zkracuje čas přípravy vzorků a zvyšuje spolehlivost výsledků.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem bylo vyvinout a ověřit LC/MS metodu s online SPE pro současné měření tří biogenních aminů v plazmě s vysokou citlivostí a selektivitou vhodnou pro klinický výzkum.
Použitá metodika a instrumentace
Instrumentace:
- LC: ACQUITY UPLC s ACQUITY UPLC Online SPE Manager
- MS: Xevo TQ-S (triple quadrupole)
- Kolona: Atlantis HILIC, 2.1 × 50 mm, 3 µm
- SPE kazeta: MassTrak WCX OSM
- Ředění plazmy 1:1 s deuterovanými interními standardy
- Filtrace 10 kDa spin filtrem pro odstranění proteinů
- Automatická extrakce na online SPE (kondicionování, ekvilibrace, načtení, promytí, eluční flush)
- Mobilní fáze A: 100 mmol/l ammonium formiát pH 3,2
- Mobilní fáze B: acetonitril
- Gradient 0–8 min s postupným nárůstem % B pro efektivní separaci
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda umožňuje oddělení 3-methoxytyraminu před metanephrinem a normetanephrinem, čímž eliminuje izobarické rušení a iontový crosstalk. Online SPE prokázala 100% recovery bez průsaků či adsorpce. Kalibrační křivky měly koeficient determinace r2 > 0,999. LLOQ jsou v rozmezí 0,0375–0,075 nmol/l, což zajišťuje měření i velmi nízkých koncentrací.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda nabízí:
- Simultánní stanovení tří metanephrinů v jednom běhu
- Minimalizaci času na přípravu a manipulaci se vzorky
- Vysokou citlivost vhodnou pro výzkum i klinické studie
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se integrace této metodiky do rutinních diagnostických sad, rozšíření panelu analyzovaných metabolitů, automatizace přípravy vzorků a využití vysoce rozlišovací MS pro širší metabolomické profily.
Závěr
Vyvinutá LC/MS metoda s online SPE je spolehlivá, citlivá a efektivní pro souběžné stanovení metanephrinu, normetanephrinu a 3-methoxytyraminu v plazmě. Umožňuje rychlou přípravu vzorků a přesné kvantifikace nízkých koncentrací.
Použitá instrumentace
- ACQUITY UPLC s ACQUITY UPLC Online SPE Manager
- Xevo TQ-S (triple quadrupole MS)
- Atlantis HILIC kolona 2.1 × 50 mm, 3 µm
- MassTrak WCX OSM kazeta
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Extraction of Catecholamines and Metanephrines from Human Plasma using EVOLUTE® EXPRESS WCX Prior to UHPLC-MS/MS Analysis
2021|Shimadzu|Aplikace
Application Note AN960 Extraction of Catecholamines and Metanephrines using EVOLUTE EXPRESS WCX | Page 1 ® Extraction of Catecholamines and Metanephrines from Human Plasma using EVOLUTE EXPRESS WCX Prior to UHPLC-MS/MS Analysis ® Norepinephrine Epinephrine Dopamine Normetanephrine Metanephrine 3-methoxytyramine Figure…
Klíčová slova
heparin, heparincitrate, citrateplasma, plasmametanephrines, metanephrineselution, elutionfort, fortpurchased, purchasedcerilliant, cerilliantanalyte, analyteextraction, extractioncatecholamines, catecholamineshuman, humanfrom, frommatrix, matrixusing
Plasma Metanephrines and 3-Methoxytyramine by LC/MS/MS
2016|Agilent Technologies|Aplikace
Plasma Metanephrines and 3-Methoxytyramine by LC/MS/MS Using Agilent SampliQ WCX SPE, 1290 Infinity LC, and 6460 Triple Quadrupole LC/MS Application Note Clinical Research Authors Abstract Linda Côté and Christophe Deckers We developed a highly sensitive and specific LC/MS/MS method to…
Klíčová slova
normetanephrine, normetanephrinemetanephrine, metanephrineplasma, plasmawere, wereagilent, agilentefficiencies, efficienciesanalytes, analytesday, dayspect, spectext, extmetanephrines, metanephrinesspe, spenitrogen, nitrogenepinephrine, epinephrineextraction
Urinary Catecholamines, Metanephrines, and 3-Methoxytyramine in a Single LC/MS/MS Run
2016|Agilent Technologies|Aplikace
Urinary Catecholamines, Metanephrines, and 3-Methoxytyramine in a Single LC/MS/MS Run Using Agilent Bond Elut Plexa SPE, 1290 Infinity LC, and 6460 Triple Quadrupole LC/MS Application Note Clinical Research Authors Abstract Linda Côté and Christophe Deckers We developed a highly sensitive…
Klíčová slova
metanephrine, metanephrineepinephrine, epinephrinenorepinephrine, norepinephrinenormetanephrine, normetanephrinedopamine, dopaminenmol, nmolresponses, responsesintraday, intradayconcentration, concentrationfree, freetotal, totalrelative, relativeboronate, boronateurine, urineagilent
Extraction of Catecholamines and Metanephrines from Human Plasma Biotage® Extrahera™ LV-200 and Low Volume SPE Prior to UHPLC-MS/MS Analysis
2022|Shimadzu|Aplikace
Automated Extraction of Catecholamines and Metanephrines using Biotage Extrahera LV-200 and Low volume SPE | Page 1 ® ™ Extraction of Catecholamines and Metanephrines from Human Plasma Biotage Extrahera LV-200 and Low Volume SPE Prior to UHPLC-MS/MS Analysis ® ™…
Klíčová slova
pressure, pressurebiotage, biotagesettings, settingscollect, collecttab, tabsteps, stepsposition, positionadvanced, advancedpositive, positivedry, dryplasma, plasmaelution, elutionnone, nonebar, barvolume
