VYUŽITÍ KAPILÁRNÍ ZÓNOVÉ ELEKTROFORÉZY PRO ANALYTICKÉ HODNOCENÍ VYBRANÝCH DERIVÁTŮ AKRIDINU

Význam tématu

Deriváty akridinu představují významnou skupinu farmaceutických chemoterapeutik s prokázanou antibakteriální, antimykotickou a antimalarickou aktivitou. Kontrola jejich identity a čistoty je klíčová pro bezpečnost a účinnost léčivých přípravků. Kapilární zónová elektroforéza (CZE) je moderní technika nabízející rychlou separaci, nízkou spotřebu vzorku a vysokou citlivost.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo optimalizovat podmínky CZE pro separaci čtyř nově syntetizovaných derivátů akridinu a vyhodnotit možnosti aplikace metody pro kontrolu čistoty těchto látek. Autoři se zaměřili na výběr vhodného pH nosného elektrolytu a posouzení kvality separace pomocí chromatografické optimalizační funkce (COF).

Použitá metodika a instrumentace

• Přístroj: Crystal CE systém ATI Unicam s UV detektorem Unicam 4225.
• Kapilára: křemenná, vnitřní průměr 75 μm, délka 60 cm; teplota 30 °C.
• Injekce: tlakově 1000 Pa po dobu 3 s, napětí 25 kV, detekční vlnová délka 256 nm.
• Nosné elektrolyty: čtyři pufry s pH 3,73; 4,52; 6,15; 8,24 kombinující aminokyseliny a morfolinové pufry.
• Kalibrace: rozsah 0,001–0,5 mg·ml⁻¹, vnitřní normalizace.
• Měření elektroosmotického toku: roztok thiomočoviny 30 mmol·l⁻¹.

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza závislosti procentuálního obsahu derivátů na pH ukázala, že pH 6,15 zajistí optimální separaci pro tři z nich, zatímco pro nejpomalejší analyt BG 474 je nejlepší pH 3,73, kde se dosáhne nejnižšího výskytu doprovodných nečistot. Hodnoty COF potvrdily synergický efekt optimálního pH na kvalitu separace. Elektropherogram při pH 3,73 dokumentuje dobře rozlišené píky derivátů v rozmezí retenčních časů 6,3–8,0 min. Kalibrační závislosti vykazovaly lineární průběh s koeficienty determinace nad 0,996 a poměry signál/šum pro nejnižší koncentrace mezi 5,3 a 12,7, což indikuje vysokou citlivost metody (mez stanovitelnosti < 1 μg·ml⁻¹).

Přínosy a praktické využití metody

CZE umožňuje rychlou a efektivní kontrolu kvality farmaceutických derivátů akridinu s minimální spotřebou reagencií. Vysoká rozlišovací schopnost a citlivost metody podporují její uplatnění v QA/QC provozech i výzkumných laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj zahrnuje integraci CZE s hmotnostní spektrometrií pro detailní strukturní analýzu, mikročipové elektroforézy pro vyšší throughput a automatizaci přípravy vzorků. Rozšíření metodiky na jiné bioaktivní struktury podpoří její širší využití v farmaceutickém vývoji.

Závěr

Navržená metoda CZE pro stanovení čtyř derivátů akridinu prokázala vysokou selektivitu, reprodukovatelnost a citlivost. Optimální pH nosného elektrolytu bylo identifikováno podle kvality separace a obsahu nečistot. Zavedení této techniky přispívá k efektivnější kontrole kvality farmaceutických přípravků.

Reference

1. Modrá Z.: Remedia 2, 821 (1994).
2. Barbe J.: Bulletin Ist Acrival Meeting on Chemotherapy of Trypanosomatidae, s. 63, Marseille 1992.
3. Kováč J., Kováč Š.: Organická chemia, SNTL, Praha 1977.
4. Jurlina J. L., Paxton J. W.: J. Chromatogr. B 342, 431 (1985).
5. Altria K. D.: J. Chromatogr. A 735, 43 (1996).
6. Lloyd D. K.: J. Chromatogr. A 735, 29 (1996).
7. Churáček J. a kol.: Analytická separace látek, SNTL, Praha 1990.